[发明专利]一种对JEV易感的猪扁桃体细胞系在审
申请号: | 201910735386.3 | 申请日: | 2019-08-09 |
公开(公告)号: | CN110468107A | 公开(公告)日: | 2019-11-19 |
发明(设计)人: | 马志永;刘珂;郗淑敏;邵东华;魏建超;李蓓蓓;邱亚峰 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12R1/91 |
代理公司: | 11246 北京众合诚成知识产权代理有限公司 | 代理人: | 马超前<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 慢病毒颗粒 猪扁桃体 嘌呤霉素 培养液 传代 慢病毒载体 辅助包装 扩大培养 细胞筛选 阳性细胞 感染原 血清 转染 细胞 敏感 研究 | ||
1.一种对JEV易感的猪扁桃体细胞系,其特征在于,该细胞系是通过慢病毒颗粒感染原代猪扁桃体细胞系,并在添加嘌呤霉素的含血清的DMEM/F12培养液中进行细胞筛选,再将阳性细胞用不含嘌呤霉素的培养基扩大培养获得的;
其中,所述慢病毒颗粒是通过以pHY-sv40-Puro作为慢病毒载体,以psPAX2和pCMV-VSV-G作为辅助包装载体,共同转染进入293T细胞中获得的。
2.根据权利要求1所述的对JEV易感的猪扁桃体细胞系,其特征在于,所述原代猪扁桃体细胞系是在5%FBS的DMEM/F12培养基中进行培养过的,且在培养基中添加100U/mL的青霉素和100μg/mL的链霉素。
3.根据权利要求1所述的对JEV易感的猪扁桃体细胞系,其特征在于,所述慢病毒颗粒采用2%FBS的DMEM培养。
4.根据权利要求1所述的对JEV易感的猪扁桃体细胞系,其特征在于,所述扩大培养的培养基为不含嘌呤霉素的5%FBS的DMEM/F12培养基。
5.根据权利要求1所述的对JEV易感的猪扁桃体细胞系,其特征在于,所述感染时加入5μg/mL的凝聚胺。
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