[发明专利]一种用于检测miRNA的水凝胶的制备方法及应用

说明书

本发明提供一种用于检测miRNA的水凝胶的制备方法，是一种批量生产水凝胶的技术，使用停止流动光刻的方法，并通过改变掩膜板的形状来改变合成的水凝胶的形状以达到不同的形状代表不同的miRNA.用图形编码的技术代替传统的荧光编码，使得编码容量大大提高，并且不需要额外的光源装置进行激发，通过图像处理的方式对不同形状的水凝胶进行识别解决了传统检测方法的费时，费力费用又高的弊端，同时图像的处理与手机端APP进行结合，实现了检测智能化便携化，使用户足不出户便可实现对癌症的预防与检测，在疾病检测领域有重要的意义。

技术领域

本发明涉及水凝胶制备与图像处理技术，尤其是一种用于检测miRNA的水凝胶的制备方法及应用。

背景技术

miRNA是存在于人体的一类微小RNA，有关miRNA在癌症中的功能已经有大量的文献研究，多项研究表明在人类外周血也存在miRNA，并且多种癌症患者的外周血miRNA表达谱发生特异性改变越来越多证据表明循环miRNA可作为一种新颖的分子标志物应用于癌症诊断和预后评估.传统的基于miRNA的检测如基因测序、荧光定量PCR等，但是这些检测方式毫无例外都需要大型的仪器配合，不仅费时、费力，而且只适合医院等一些检测机构，无法造福于每个家庭以实现便携、惠民大众化。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于检测miRNA的水凝胶的制备方法。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供一种基于水凝胶的miRNA检测技术。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种用于检测miRNA的水凝胶的制备方法，具体步骤如下：

1)透光掩模版的图案设计：掩膜板直径为30mm、厚度为1mm；

2)停止流动光刻平台的搭建；

3)水凝胶检测；

4)制备连接有miRNA适配体的水凝胶微粒。

优选的，上述用于检测miRNA的水凝胶的制备方法，所述步骤1)透光掩模版的图案设计，具体步骤如下：使用L-Edit软件，选定直径为30mm的区域作为工作区域，在此工作区域的中心位置选取长为5-7mm、宽为3-5mm的区域做另一图层，然后用工作区域减去此图层便得到中心区域为长方形的掩膜板，另外利用此种方法继续合成长方形、正方形、圆形或三角形。

优选的，上述用于检测miRNA的水凝胶的制备方法，所述步骤2)停止流动光刻平台的搭建，具体步骤如下：

(1)将上述掩膜板置于显微镜的光路中，调整好角度与聚焦位置；

(2)将PDMS芯片(高60μm，长1cm)分别载气通道的两端打孔，一端为进样孔，一段为出样孔；

(3)将紫外光源连入显微镜的光路中调整焦距使光源聚焦到通道中，调整目镜放大倍数为10×，物镜放大倍数为40×。

优选的，上述用于检测miRNA的水凝胶的制备方法，所述步骤4)制备连接有miRNA适配体的水凝胶微粒，具体步骤如下：

(1)制备预聚物溶液：将3.5毫升PEG-DA 700液体，2毫升PEG 200液体，0.5ml光引发剂Darocur 1173液体与4毫升的3×TE缓冲液混匀，做为预聚物溶液待用；

(2)将预聚物注入进样口处的注射器中，将注射器装入注射泵，设定注射速度为500-1000μm/min；

(3)开启注射泵，使预聚物充满通道，停止注射泵工作，打开紫外光源曝光50-100ms，形成颗粒后重新开启注射泵将颗粒冲出，重复以上步骤直至获得足够数量的水凝胶颗粒；