[发明专利]从万年蒿中提取分离倍半萜内酯类化合物的方法

说明书

本发明涉及从万年蒿中提取分离倍半萜内酯类化合物的方法，所述倍半萜内酯类化合物包括：1α‑乙酰基桉叶‑4‑烯6β，11β氢‑12,6内酯；(11S)‑3‑氧络桉烷‑1,4‑(15)‑二烯烃‑12,6α内酯；1‑表去氢异黄酮；11‑表阿霉素；菊花素；1α‑乙酰基加利卡多醇；氰菊酯；1α，4α‑二羟基桉叶‑2‑烯‑5α，6β，11β氢‑12,6‑内酯；牛蒿素；(+)‑去氢催吐萝芙木醇；提取分离方法为：采用硅胶、ODS开放柱和半制备液相色谱等多种色谱方法，对万年蒿的95％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分进行分离纯化，分离得到上述10个化合物。该提取方法简单，提取效率高，提取的化合物数量多，为倍半萜内酯化合物的药理性研究奠定基础。

技术领域

本发明涉及化合物提取领域，具体涉及一种从万年蒿中提取分离倍半萜内酯类化合物的方法。

背景技术

倍半萜内酯类化合物是药用植物的活性组分，广泛存在于大戟科、爵床科、伞形科、木兰科、防己科及菊科等植物中。目前从菊科植物中分离到的倍半萜内酯就超过3000种结构。倍半萜内酯类化合物具有抗炎、抗病毒等活性，因此如何有效的将药用植物内的倍半萜内酯活性组分提取出来，得到纯度较高的产品，对于倍半萜内酯类化合物的深度研究具有重要的作用。

由于倍半萜内酯类化合物为手性化合物，立体环境比较复杂，采用化学合成方式获得，合成路线繁琐，成本高，且纯度难以保证；因此，目前主要采用在药用植物中分离提取的方式获得；然而，现有药用植物每次分离提取的倍半萜内酯类化合物数量少，严重影响对倍半萜内酯类化合物的研究。

万年蒿(Artemisia sacrorum Ledeb.)为菊科(Compositae)蒿属(Artemisia)半灌木状草本植物，生于中低海拔地区的山坡、路旁、灌丛地及森林草原地区，其干燥地上部分为朝鲜族常用药材，收载于《吉林省药品标准》1977年版中，具有清热利湿，退黄的功效，用于急慢性肝炎，肝硬化的治疗。万年蒿的化学成分有一些报道，主要含有倍半萜内酯、黄酮、香豆素等化学成分。然而，现有仅从万年蒿中分离提取出3个倍半萜内酯化合物，包括去乙酰氧母菊内酯， Ridentin，万年蒿氯内酯，对于其它倍半萜内酯化合物无法分离得到。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从万年蒿中提取分离倍半萜内酯类化合物的方法，以解决现有无法从万年蒿中提取除上述三种倍半萜内酯化合物以外的其它倍半萜内酯化合物的技术问题。

为实现上述目的，本发明是采用如下技术方案实现的：

从万年蒿中提取分离倍半萜内酯类化合物的方法，其中，所述倍半萜内酯类化合物包括： 1α-乙酰基桉叶-4-烯6β，11β氢-12,6内酯；(11S)-3-氧络桉烷-1,4-(15)-二烯烃-12,6α内酯； 1-表去氢异黄酮；11-表阿霉素；菊花素；1α-乙酰基加利卡多醇；氰菊酯；1α，4α-二羟基桉叶-2-烯-5α，6β，11β氢-12,6-内酯；牛蒿素；(+)-去氢催吐萝芙木醇；提取分离方法包括以下步骤：

步骤S1、取干燥万年蒿地上部分，粉碎后依次用6-8倍量的95％乙醇回流提取2-4次，每次1-2h，合并提取液，提取液减压浓缩得浸膏；

步骤S2、取浸膏加适量水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，回收溶剂后分别得到石油醚部分和乙酸乙酯部分；

步骤S3、取乙酸乙酯部分进行硅胶柱色谱分离，用石油醚-乙酸乙酯(1:0→4:1)梯度洗脱，每个梯度所用洗脱溶剂为20L，收集洗脱液，每10L洗脱液为1个部分，分别减压浓缩，得到4个部分，即Fr.1～Fr.4；其中，所述硅胶柱内径为10cm；

步骤S4、将步骤S3获得的Fr.3经硅胶柱色谱分离，用石油醚-丙酮(5:1→1:1)梯度洗脱，每个梯度所用洗脱溶剂为20L，收集洗脱液，每10L洗脱液为1个部分，分别减压浓缩，得 4个亚组分，即Fr.3-1～Fr.3-4；其中，所述硅胶柱内径为10cm；