[发明专利]一种富血小板血浆和提取富血小板血浆的方法在审
申请号: | 201910745517.6 | 申请日: | 2019-08-13 |
公开(公告)号: | CN110538196A | 公开(公告)日: | 2019-12-06 |
发明(设计)人: | 潘若浪;巫飞飞;戴玲华 | 申请(专利权)人: | 杭州易文赛生物技术有限公司 |
主分类号: | A61K35/16 | 分类号: | A61K35/16;A61P7/04;A61P17/02;A61P19/08 |
代理公司: | 11447 北京英创嘉友知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 耿超<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
地址: | 311100 浙江省杭州市余*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 浓集物 离心产物 富血小板血浆 血浆层 冻融 取出 生理盐水稀释 生理盐水洗涤 血小板 操作误差 红细胞层 抗凝处理 白膜层 得率 全血 沉淀 | ||
1.一种提取富血小板血浆的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、将抗凝处理后的全血进行第一离心,得到第一离心产物;所述第一离心产物包括由上到下分布的第一血浆层、第一白膜层以及第一红细胞层;
S2、将所述第一红细胞层上段的0-5mm与所述第一血浆层和所述第一白膜层取出,得到取出的第一浓集物和剩余的第二浓集物;将所述第一浓集物进行第二次离心,得到第二离心产物;所述第二离心产物包括由上到下分布的第二血浆层、第二白膜层以及第二红细胞层;弃掉所述第二血浆层的50-75%的上段,得到剩余的第三浓集物;
S3、将所述第二浓集物用生理盐水稀释后进行冻融处理,并将冻融处理后的物料用生理盐水洗涤并离心,将离心所得的沉淀作为第四浓集物;
S4、将所述第三浓集物与所述第四浓集物混合。
2.根据权利要求1所述的提取富血小板血浆的方法,其中,冻融处理的条件包括:冷冻温度为零下196℃至零下40℃;冷冻时间为20~60min;解冻温度为10-35℃;解冻的升温速度为0.1-10℃/分钟。
3.根据权利要求1所述的提取富血小板血浆的方法,其中,所述全血的来源为人或哺乳动物;所述抗凝处理使用的抗凝剂为肝素钠、枸橼酸钠、EDTA盐和草酸盐中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的提取富血小板血浆的方法,其中,步骤S2中,将所述第一红细胞层上段的1-3mm与所述第一血浆层和所述第一白膜层取出;弃掉所述第二血浆层的60-75%的上段。
5.根据权利要求1所述的提取富血小板血浆的方法,其中,步骤S3中,将所述第二浓集物用生理盐水稀释时,生理盐水的添加量为所述全血体积的1~3倍。
6.根据权利要求1所述的提取富血小板血浆的方法,其中,第一次离心的离心力为200-400g,时间为18-22min;第二次离心的离心力为1500-1900g,时间为14-16min。
7.根据权利要求1所述的提取富血小板血浆的方法,其中,步骤S3中,进行洗涤并离心的步骤包括:
S31、将所述第二浓集物冻融处理后的物料进行第三次离心,得到第三离心产物;
S32、将所述第三离心产物的上清进行第四次离心,得到第四离心产物;
S33、弃掉所述第四离心产物上清的50-75%的上段,在剩余的所述第四离心产物中加入生理盐水洗涤2-4次。
8.根据权利要求7所述的提取富血小板血浆的方法,其中,S33步骤中,弃掉所述第四离心产物上清的60-75%的上段;加入生理盐水洗涤时的离心的离心力为1800-2200g,时间为9-11min;所述第三次离心的离心力100-300g,时间为14-16min;所述第四次离心的离心力1500-1800g,时间为9-11min。
9.根据权利要求1-8所述的任意一种提取富血小板血浆的方法制得的富血小板血浆。
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