[发明专利]一种富血小板血浆和提取富血小板血浆的方法

说明书

本发明提供了一种提取富血小板血浆的方法和用该方法制得的取富血小板血浆，该方法主要包括以下步骤：将抗凝处理后的全血进行第一离心，得到第一离心产物；将第一离心产物红细胞层上段的0‑5mm与血浆层和白膜层取出，得到取出的第一浓集物和剩余的第二浓集物；将第一浓集物进行第二次离心，得到第二离心产物；弃掉第二离心产物血浆层的50‑75％的上段，得到剩余的第三浓集物；将第二浓集物用生理盐水稀释后进行冻融处理，并将冻融处理后的物料用生理盐水洗涤并离心，将离心所得的沉淀作为第四浓集物；将第三浓集物与第四浓集物混合。该方法人为操作误差小，显著提升了富血小板血浆中血小板得率。

技术领域

本申请涉及医疗技术领域，具体的，涉及一种富血小板血浆和提取富血小板血浆的方法。

背景技术

富血小板血浆(platelet-rich in plasma，PRP)是一种外周血来源的血小板浓集物，通过离心全血得到的含高浓度血小板血浆。PRP最初是作为一种生物凝胶和屏障膜，在临床上用于增强止血的效果。研究发现PRP中包含多种生长因子，如PDGF、TGF-β、EGF、VEGF、IGF、FGF以及调节伤口的其它分子，可以促进伤口愈合和组织再生，由于这些特点使PRP广泛应用于颌面外科、整形外科、骨科、运动医学及难治性皮肤溃疡等医学领域研究中。目前，PRP已在大鼠骨缺损模型、山羊下颌骨缺损模型中，PRP复合材料的植入与对照组相比新骨生成量明显增加，骨修复和愈合程度也明显加快等。同时在动物组织创伤也表现出了良好的应用效果，包括创面抗感染，促进伤口愈合。但是，PRP的制备方法尚存在回收率较低、浓度等指标变异系数大、生物活性不高等缺陷。

发明内容

本公开的目的是提供一种提取富血小板血浆的方法，该方法制得的血小板浓集物血小板得率明显提高，浓度保持稳定，且生物活性明显改善。

本公开提供一种提取富血小板血浆的方法，包括以下步骤：

S1、将抗凝处理后的全血进行第一离心，得到第一离心产物；所述第一离心产物包括由上到下分布的第一血浆层、第一白膜层以及第一红细胞层；

S2、将所述第一红细胞层上段的0-5mm与所述第一血浆层和所述第一白膜层取出，得到取出的第一浓集物和剩余的第二浓集物；将所述第一浓集物进行第二次离心，得到第二离心产物；所述第二离心产物包括由上到下分布的第二血浆层、第二白膜层以及第二红细胞层；弃掉所述第二血浆层的50-75％的上段，得到剩余的第三浓集物；

S3、将所述第二浓集物用生理盐水稀释后进行冻融处理，并将冻融处理后的物料用生理盐水洗涤并离心，将离心所得的沉淀作为第四浓集物；

S4、将所述第三浓集物与所述第四浓集物混合。

优选的，冻融处理的条件包括：冷冻温度为零下196℃至零下40℃；冷冻时间为20～60min；解冻温度为10-35℃；解冻的升温速度为0.1-10℃/分钟。

优选的，所述全血的来源为人或哺乳动物；所述抗凝处理使用的抗凝剂为肝素钠、枸橼酸钠、EDTA盐和草酸盐中的至少一种。

优选的，步骤S2中，将所述第一红细胞层上段的1-3mm与所述第一血浆层和所述第一白膜层取出；弃掉所述第二血浆层的60-75％的上段。

优选的，步骤S3中，将所述第二浓集物用生理盐水稀释时，生理盐水的添加量为所述全血体积的1～3倍。

优选的，第一次离心的离心力为200-400g，时间为18-22min；第二次离心的离心力为1500-1900g，时间为14-16min。

优选的，步骤S3中，进行洗涤并离心的步骤包括：

S31、将所述第二浓集物冻融处理后的物料进行第三次离心，得到第三离心产物；

S32、将所述第三离心产物的上清进行第四次离心，得到第四离心产物；