[发明专利]人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和髓过氧化物酶检测试剂盒

权利要求书

1.一种人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和髓过氧化物酶检测试剂盒，其特征在于，包括以下两种类型：

A）人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和髓过氧化物酶的化学发光免疫检测试剂盒和化学显色免疫检测试剂盒，其组分包括：

①人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和人髓过氧化物酶标准品；

②包被有人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白单克隆抗体和人髓过氧化物酶单克隆抗体的载体，所述包被有人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白单克隆抗体和人髓过氧化物酶单克隆抗体的载体的制备方法为：以碳酸盐缓冲液为溶剂，将人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白单克隆抗体和人髓过氧化物酶单克隆抗体与溶剂混合均匀后，负载于载体上，将载体清洗干净后，采用封闭液封闭载体，干燥后，得到包被有人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白单克隆抗体和人髓过氧化物酶单克隆抗体的载体；

③标记的人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白单克隆抗体和人髓过氧化物酶单克隆抗体；③中所述标记抗体与②中所述包被抗体为配对抗体，分别与人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和人髓过氧化物酶形成双抗-夹心结构；人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白配对抗体和人髓过氧化物酶配对抗体之间无交叉反应；

④用于显色的底物；

B）人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和髓过氧化物酶的胶体金法免疫层析检测试剂盒，包括：

①粘贴在底板一端的上样垫；

②与上样垫紧密压接的含有标记的人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白单克隆抗体和人髓过氧化物酶单克隆抗体的胶体金垫，所述胶体金垫的制备过程为：以氯金酸-柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液，在胶体金溶液中加入标记的人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白单克隆抗体和人髓过氧化物酶单克隆抗体，室温搅拌2 小时，加入终浓度为1％牛血清白蛋白，1％聚乙二醇20000封闭20min，离心，弃上清，用胶体金工作液复溶，将溶液均匀地铺在玻璃纤维膜或无纺布上制成胶体金垫；

③与胶体金垫一端紧密压接的硝酸纤维素NC膜，硝酸纤维素NC 膜上包被有相互分离的检测线T和质控线C，所述检测线T上包被有与②所述标记抗体配对的人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白单克隆抗体和人髓过氧化物酶单克隆抗体，所述质控线C上包被有羊抗鼠IgG抗体；所述检测线T上的包被抗体和②中所述标记抗体为配对抗体，分别与人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和人髓过氧化物酶形成双抗-夹心结构；人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白配对抗体和人髓过氧化物酶配对抗体之间无交叉反应；

其中，所述硝酸纤维素NC膜的制备为：NC膜包被用0.01M pH7.4PBS将包被人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和髓过氧化物酶抗体稀释成0.5mg/ml、1mg/ml或1.5mg/ml，羊抗鼠IgG分别稀释成1mg/ml或2mg/ml，然后用喷膜仪在NC膜上按1.2ul/cm进行分别划线包被，包被完成后将NC膜在温度20～25℃，相对湿度＜30％的干燥间干燥2～5小时；

④与硝酸纤维素NC膜紧密压接的吸样垫；

其中，试剂盒被配置为用于检测鼻腔分泌物中的炎症因子。

2.根据权利要求1所述的人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和髓过氧化物酶检测试剂盒，其特征在于，所述载体为微孔板、磁性颗粒、塑料管或塑料珠。

3.根据权利要求1所述的人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和髓过氧化物酶检测试剂盒，其特征在于，A）中所述用于标记的酶为碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶。

4.根据权利要求1所述的人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白和髓过氧化物酶检测试剂盒，其特征在于，A）中所述化学发光免疫检测试剂盒中的显色底物为鲁米诺、异鲁米诺、（金刚烷）-1，2-二氧乙烷、3-（2’-螺旋金刚烷）-4-甲氧基-4-（3’-磷酰氧基）苯基-1、2-二氧乙烷、CSPD 或CDP-Star；所述化学显色免疫检测试剂盒中显色底物为3,3',5,5'-四甲基联苯胺、或二氨基联苯胺。