[发明专利]一种酶催化的蛋白质C-端选择性酰肼化修饰方法有效
| 申请号： | 201910752587.4 | 申请日： | 2019-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN112391429B | 公开（公告）日： | 2022-03-15 |
| 发明（设计）人： | 吴边;李瑞峰;丰婧 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12P21/00 | 分类号： | C12P21/00;C12N9/78;C12N9/02;C12N15/53;C12N15/55 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 张立娜 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 催化 蛋白质 选择性 酰肼化 修饰 方法 | ||
1.一种对蛋白质C端进行酰肼化修饰的方法，包括如下步骤：
(a1)在待修饰蛋白质的C末端连接一个甘氨酸；
(a2)步骤(a1)获得的连接有一个甘氨酸的待修饰蛋白质经酶1催化，反应后获得C末端被酰胺化的待修饰蛋白质；
(a3)步骤(a2)获得的C末端被酰胺化的待修饰蛋白质经酶2催化与带有修饰基团的亲核有机胺反应，从而完成对所述待修饰蛋白质的C端的酰肼化修饰；
所述酶1为氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质；
所述酶2为氨基酸序列为SEQ ID No.2的蛋白质；
所述带有修饰基团的亲核有机胺为如下任一：
NH2NH2
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法中，被修饰的蛋白质的C端氨基酸为脯氨酸外的其他19种组成生物体蛋白的氨基酸中的任一种；和/或
所述方法中，被修饰的蛋白质的C端氨基酸为C末端第1位氨基酸。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤(a2)和步骤(a3)中，均无需对所述待修饰蛋白质进行侧链保护。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤(a2)和步骤(a3)中，进行所述反应时的溶剂均为水。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤(a2)中，进行所述反应时的温度为25-37℃。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤(a3)中，进行所述反应时的温度为20-60℃。
7.一种试剂盒在对蛋白质C端进行酰肼化修饰中的应用；
所述试剂盒含有权利要求1中所述的带有修饰基团的亲核有机胺和如下任一生物材料：
(I)成套酶，由权利要求1中的所述酶1和所述酶2组成；
(II)成套编码基因，由所述酶I的编码基因1和所述酶2的编码基因2组成；
(III)成套表达盒，由含有所述编码基因1的表达盒1和含有所述编码基因2的表达盒2组成；
(IV)成套重组载体，由含有所述编码基因1的重组载体1和含有所述编码基因2的重组载体2组成；
(V)成套重组菌，由含有所述编码基因1的重组菌1和含有所述编码基因2的重组菌2组成。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述试剂盒中还含有记载有权利要求1-6中任一所述方法的可读性载体。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院微生物研究所，未经中国科学院微生物研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910752587.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：治疗咳嗽的组合物、制备方法和制剂
- 下一篇：中药组合物的质量控制方法
