[发明专利]IgA2检测试剂在制备KRAS突变型结直肠癌诊断剂方面的应用

说明书

本发明属于生物医药领域，涉及免疫球蛋白亚型中的IgA2的检测试剂在制备KRAS突变型结肠直肠癌诊断或预后试剂/试剂盒中的应用。本发明研究发现，免疫球蛋白亚型中的IgA2在KRAS突变型结肠直肠癌中低表达，且具有很大的差异性和可信度。将IgA2作为结直肠癌诊断生物标记物，具有特异性强，灵敏度高的优势，有利于提高结肠直肠癌的诊疗水平，有效防治结直肠癌。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及IgA2的检测试剂在制备KRAS突变诊断试剂/试剂盒中的应用和一种结肠直肠癌诊断的试剂/试剂盒。

发明背景

结直肠癌(colorectal cancer，CRC)是最常见的消化道恶性肿瘤，是世界第二大癌症，其高发病率和致死率分别位于第三位和第四位。近年来随着我国人民生活水平的提高、生活方式的改变以及人口老龄化，结直肠癌在我国的发病率呈现逐渐上升的趋势，居我国恶性肿瘤发病率第三位和死亡率第五位，严重威胁着人们的健康和生命。早发现、早诊断、早治疗是治疗结直肠癌的关键。但是结直肠癌初期多数没有明显症状，随病情进展多以“肠炎”就诊，使得大部分结直肠癌患者确诊时已处于肿瘤进展期，失去了最佳的治疗时机，导致其五年生存率不到20％，预后较差。因此，探索结直肠癌早期、快速、大规模的诊断方法，提高诊疗水平，是目前防治结直肠癌亟待解决的问题。

KRAS属于RAS基因家族成员，编码的P21蛋白位于细胞膜内侧，属于三磷酸(GTP)鸟苷结合蛋白，是细胞内信号传导通路中重要的“开关”。正常情况下，对细胞增殖、生存和分化方面有至关重要的正向作用；但当KRAS发生突变时，其不能被水解酶水解失活，处于持续激活状态，致使RAF/MAPK的上调，从而使细胞过度生长、增殖，导致多种恶性肿瘤的产生。研究显示，大约有30％-45％的结直肠癌患者携带原癌基因KRAS的突变。

美国国家癌症综合治疗联盟(NCCN)《结直肠癌临床实践指南》(V1.2015)明确指出：(1)所有转移性结直肠癌患者都应检测KRAS基因状态；(2)只有KRAS野生型患者才建议接受EGFR抑制剂(如爱必妥和帕尼单抗)治疗。卫生部颁布的《结直肠癌诊疗规范(2010年版)》也明确指出：确定为复发或转移性结直肠癌时，检测肿瘤组织KRAS基因状态，以确定合适的治疗方案。由此可知，监测结直肠癌患者KRAS突变水平具有重要的临床意义。目前临床上广泛使用结直肠癌患者活检组织通过测序来确定KRAS基因是否突变，虽然这种方法比较准确，但受限于检测方法，无法通过这种方式进行大规模筛查。这些检测都需要针对肿瘤活检组织进行测序，并且是针对肿瘤原位进行的测序。活体检测创伤易引起肿瘤转移，且存在无法动态多次检测的问题。血清肿瘤标志物检测因其取样快速、方便、安全，已成为用于肿瘤早期诊断、鉴别及分期指导、肿瘤复发转移判断的常用手段。

人的血清中含有大量的免疫球蛋白(Immunoglobulin，Ig)，免疫球蛋白是一种主要由浆细胞分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等病原体的大型Y形蛋白质，具有多种免疫球蛋白亚型；更重要的是，免疫球蛋白的不同亚型在机体遭受感染时会出现波动变化；且与其他蛋白分子相比，免疫球蛋白具有更稳定的性质及更长的半衰期，这些特点使得血浆中不同免疫球蛋白亚型表达水平在感染及肿瘤等疾病诊断应用上具有广阔的前景。