[发明专利]一种提高酿酒酵母合成角鲨烯能力的方法有效
申请号: | 201910754882.3 | 申请日: | 2019-08-15 |
公开(公告)号: | CN110607247B | 公开(公告)日: | 2021-06-08 |
发明(设计)人: | 谢文平;万丹;蔡燕丰;鲍素敏;姚红涛;刘翠翠;郭振权;李文佳;李峰 | 申请(专利权)人: | 宜昌东阳光生化制药有限公司 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12P5/02;C12N15/81;C12R1/865 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 肖阳 |
地址: | 443300 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 酿酒 酵母 合成 角鲨烯 能力 方法 | ||
1.一种酿酒酵母,其特征在于,包括:HMG-COA还原酶和角鲨烯合酶ERG9基因上调;以及GAL80和角鲨烯单加氧酶ERG1基因下调。
2.根据权利要求1所述的酿酒酵母,其特征在于,所述HMG-COA还原酶和ERG9基因上调以及GAL80基因下调是通过HMG-COA还原酶和ERG9基因表达盒原位替换GAL80基因实现的。
3.根据权利要求2所述的酿酒酵母,其特征在于,所述HMG-COA还原酶和ERG9基因表达盒中的HMG-COA还原酶和ERG9基因来自于黑曲霉、里氏木霉、南极假丝酵母、毕赤酵母、乳酸克鲁维酵母、解脂耶氏酵母或酿酒酵母。
4.根据权利要求2所述的酿酒酵母,其特征在于,所述HMG-COA还原酶和ERG9基因表达盒中的HMG-COA还原酶和ERG9基因来自于酿酒酵母。
5.根据权利要求2所述的酿酒酵母,其特征在于,所述HMG-COA还原酶基因来自酿酒酵母HMG-COA还原酶基因的催化区tHMG。
6.根据权利要求2所述的酿酒酵母,其特征在于,所述HMG-COA还原酶和ERG9基因表达盒进一步包括酿酒酵母启动子,所述酿酒酵母启动子与所述HMG-COA还原酶和ERG9基因可操作地连接。
7.根据权利要求6所述的酿酒酵母,其特征在于,所述酿酒酵母启动子包括选自组成型的TEF1基因启动子、ACT1基因启动子、HXT7基因启动子或TDH3基因启动子,诱导型的GAL1基因启动子、GAL10基因启动子、GAL7基因启动子和GAL2基因启动子的至少之一。
8.根据权利要求6所述的酿酒酵母,其特征在于,所述酿酒酵母启动子为诱导型的GAL1基因启动子pGAL1和GAL10基因启动子pGAL10。
9.根据权利要求8所述的酿酒酵母,其特征在于,所述HMG-COA还原酶基因与所述pGAL1可操作地连接,所述ERG9基因与所述pGAL10可操作地连接。
10.根据权利要求1所述的酿酒酵母,其特征在于,所述ERG1基因下调是通过替换ERG1基因的原有启动子pERG1为组成型的CYC1基因启动子pCYC1、甲硫氨酸抑制型的MET3基因启动子pMET3、Cu离子抑制型的CTR3基因启动子pCTR3或葡萄糖诱导型的HXT1基因启动子pHXT1实现的。
11.根据权利要求1所述的酿酒酵母,其特征在于,下调ERG1基因是通过替换ERG1基因的原有启动子pERG1为pHXT1实现的。
12.根据权利要求1所述的酿酒酵母,其特征在于,酿酒酵母菌株为选自BY4743,BY4742,BY4743,INVSC1、HEC-YLK的至少之一,所述HEC-YLK于2018年1月29日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2018062。
13.根据权利要求1所述的酿酒酵母,其特征在于,所述酿酒酵母菌株为HEC-YLK。
14.一种提高酿酒酵母合成角鲨烯能力的方法,其特征在于,使HMG-COA还原酶和角鲨烯合酶ERG9基因上调;以及使GAL80和角鲨烯单加氧酶ERG1基因下调。
15.根据权利要求14所述的方法,其特征在于,使所述HMG-COA还原酶和ERG9基因上调以及GAL80基因下调是利用HMG-COA还原酶和ERG9基因表达盒原位替换GAL80基因实现的。
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