[发明专利]一种用于湿疹治疗的外用药物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种用于湿疹治疗的外用药物及其制备方法和应用，每10ml中包括以下物质成分：间充质干细胞裂解液5‑10×10⁶个细胞的裂解成分；胸腺素beta 4 0.1‑1.5μg；转化生长因子‑β0.05‑1.0μg；溶媒补足至10ml。本发明采用生物技术，利用多种间充质干细胞的配伍，共同完成制剂对皮肤湿疹产生的伤口进行再生修复，可明显改善皮肤愈合并缩短湿疹伤口愈合时间，为湿疹开辟新的途径。

技术领域

本发明涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种用于湿疹治疗的外用药物及其制备方法和应用。

背景技术

湿疹是皮肤科最常见的由多种内外因素引起的具明显渗出倾向的皮肤炎症反应，在急性阶段以丘疱疹为主，慢性阶段以表皮肥厚和苔藓样变为主，瘙痒剧烈，易复发，外在物理性、化学性刺激以及精神因素均可能与本病的发生有关。

湿疹发病过程中免疫机制起着很重要的作用，常伴有细胞因子、嗜酸性粒细胞和肥大细胞的参与；湿疹的发生可能与I型速发型和IV型迟发型变态反应有关，湿疹患者的细胞免疫功能失调，体液免疫也有显著异常；湿疹的发生还与组胺等介质的参与有关。根据皮损状况不同应用不同外用药物进行治疗，口服药物常用抗组胺药、糖皮质激素及非特异性抗过敏药物，但长期使用会出现一系列的副作用，所以目前临床上尚缺乏安全有效、针对性强的湿疹治疗措施。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提供一种生物制剂，用于湿疹治疗，使用安全，并不会产生副作用。

为解决上述的技术问题，具体技术方案：

一种用于湿疹治疗的外用药物，每10ml中包括以下物质成分：

其中，所述溶媒为生理盐水、复方电解质注射液或葡萄糖注射液中的一种。

该用于湿疹治疗的外用药物的制备方法，包括以下步骤：将间充质干细胞裂解液用溶媒重悬后形成细胞悬液，在细胞悬液中再依次加入胸腺素beta4和转化生长因子-β，混合均匀。

具体的，所述的间充质干细胞裂解液的制备方法，包括以下步骤：

(1)从哺乳动物的脂肪组织、骨髓组织、皮肤组织中分别分离提纯出脂肪间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、皮肤间充质干细胞；将脂肪间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、皮肤间充质干细胞按1～2∶2～3∶1～2的比例混合，组成第一代混合细胞；

(2)将第一代混合细胞以密度为10000-12000个/cm²接种到培养容器中，加入完全培养基，再按完全培养基体积加入0.1％的血清，摇匀后放入培养箱，在CO₂浓度为5％、湿度为90％、温度为37℃的条件下培养，每天观察细胞生长情况，每3天清洗换液一次，待细胞融合度达到80％-90％时收集细胞，得到第二代混合细胞；

(2)将第二代混合细胞以密度为10000-12000个/cm²接种到培养容器中，加入完全培养基，再按完全培养基体积加入0.1％的血清，摇匀后放入培养箱，在CO₂浓度为5％、湿度为90％、温度为37℃的条件下培养，每天观察细胞生长情况，每3天清洗换液一次，待细胞融合度达到80％-90％时收集细胞，得到第三代混合细胞；

(3)将第三代混合细胞以密度为10000-12000个/cm²接种到培养容器中，加入完全培养基，再按完全培养基体积加入0.1％的血清，摇匀后放入培养箱，在CO₂浓度为5％、湿度为90％、温度为37℃的条件下培养，每天观察细胞生长情况，每3天清洗换液一次，待细胞融合度达到80％-90％时收集细胞，得到第四代混合细胞，收集细胞的同时收集培养第四代上清液，将第四代上清液通过0.22μm过滤，并置于4℃的温度环境中保存备用；