[发明专利]使用表面涂层对生物物质的捕获、纯化和释放在审
申请号: | 201910763075.8 | 申请日: | 2012-06-28 |
公开(公告)号: | CN110763842A | 公开(公告)日: | 2020-02-07 |
发明(设计)人: | 张瑛芝;吴汉忠;曾博元 | 申请(专利权)人: | 中央研究院 |
主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574;G01N33/543;C07K17/14;C07K16/30 |
代理公司: | 11262 北京安信方达知识产权代理有限公司 | 代理人: | 贺淑东 |
地址: | 中国台*** | 国省代码: | 中国台湾;71 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物活性组合物 非特异性细胞 循环肿瘤细胞 表面涂层 结合生物 连接体 释放性 血清 捕获 抗污组合物 微流体芯片 纯化生物 生物物质 稀有细胞 扰动 捕获率 图案化 微结构 抗污 吸附 释放 流动 | ||
1.一种用于选择性富集罕见细胞的微流体芯片,其包括:
第一固体基质和第二固体基质,其中所述第一和第二固体基质至少之一包括配置成与细胞相互作用的一系列微结构,且其中所述第一和第二固体基质配置成彼此平行结合;和
用于捕获所述罕见细胞的表面涂层,其中所述表面涂层包含脂质层和生物活性组合物,其中所述生物活性组合物包含与所述罕见细胞选择性结合的抗体,其中所述表面涂层的所述脂质层与所述生物活性组合物非共价结合,其中所述第一和第二固体基质各包含所述表面涂层。
2.权利要求1的微流体芯片,其中所述微结构有序排列进而从所述微流体芯片的一侧纵向地前进到微流体芯片的另一侧,所述微结构之间的开口是交错的。
3.权利要求1的微流体芯片,其中所述罕见细胞是循环肿瘤细胞。
4.权利要求1的微流体芯片,其中所述抗体是生物素化的EpCAM抗体。
5.权利要求1的微流体芯片,其中所述脂质层包含脂质单层、脂质双层或脂质体。
6.权利要求1的微流体芯片,其中所述两种固体基质包括玻璃基质和塑料基质。
7.权利要求6的微流体芯片,其中所述玻璃基质在工作配置中位于所述塑料基质下方。
8.权利要求1的微流体芯片,其中所述第一固体基质包括所述一系列微结构,且其中所述第一固体基质在工作配置中位于所述第二固体基质上方。
9.权利要求1的微流体芯片,其进一步包括用于将所述第一固体基质粘合至所述第二固体基质的粘接剂。
10.权利要求9的微流体芯片,其中所述粘接剂包括呈通道形式的内中空开口。
11.权利要求10的微流体芯片,其中所述通道配置成涵盖所述一系列微结构。
12.权利要求10的微流体芯片,其中所述粘接剂的所述通道决定所述罕见细胞穿过所述微流体芯片的路径。
13.权利要求9的微流体芯片,其中所述粘接剂的厚度决定所述微流体芯片通道的高度。
14.权利要求1的微流体芯片,其中所述抗体包含结合EpCAM的重链和轻链,其中(a)所述重链包含SEQ ID No:1的CDR1、CDR2和CDR3,且(b)所述轻链包含SEQ ID No:2的CDR1、CDR2和CDR3。
15.权利要求1的微流体芯片,其进一步包括注射泵,其中所述注射泵配置成以流速施加缓冲液,所述流速配置成从所述脂质层释放非特异性细胞而不释放选择性结合所述生物活性组合物的细胞。
16.权利要求1的微流体芯片,其进一步包括注射泵,所述注射泵配置成以约2.5至约10达因/cm2的剪切力使用缓冲液辅助冲洗所述微流体芯片。
17.权利要求1的微流体芯片,其中所述脂质层通过表面接头与所述第一和第二固体基质中的每一个偶联。
18.权利要求1的微流体芯片,其中所述脂质层为2nm至300μm厚。
19.权利要求1的微流体芯片,其中所述表面涂层与所述固体基质通过以下非共价相互作用的一种连接至所述固体基质:共价键合、氢键键合、静电相互作用、亲水-亲水相互作用、极性-极性相互作用、磁力或其组合。
20.权利要求1的微流体芯片,其中所述脂质层配置成完全涂覆所述第一和第二固体基质的每一种。
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