[发明专利]纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种制备纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗的方法，所述方法包括：

(1)提供肿瘤细胞裂解液；

(2)将所述肿瘤细胞裂解液离心，收集上清；

(3)过滤所述上清，然后通过离子层析柱，收集蛋白流出物；

(4)任选地，使所述蛋白流出物通过分子层析柱；

(5)将通过步骤(3)或任选的步骤(4)得到的产物通过亲和免疫层析柱1、2、3进行纯化，所述亲和免疫层析柱1、2、3分别特异性吸附不同亚型的单一HSP，分别得到经纯化的单一的HSP/肽复合物1、经纯化的单一的HSP/肽复合物2和经纯化的单一的HSP/肽复合物3；

(6)将所述经纯化的单一的HSP/肽复合物1、所述经纯化的单一的HSP/肽复合物2和所述经纯化的单一的HSP/肽复合物3以适当比例混合，以得到所述纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述经纯化的单一的HSP/肽复合物1、所述经纯化的单一的HSP/肽复合物2和所述经纯化的单一的HSP/肽复合物3以来源肿瘤组织中单一的HSP/肽复合物1、单一的HSP/肽复合物2和单一的HSP/肽复合物3的比例混合。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述经纯化的单一的HSP/肽复合物1是HSP70/肽复合物、HSP90/肽复合物、Gp96/肽复合物中的任一种；所述经纯化的单一的HSP/肽复合物2是不同于所述经纯化的单一的HSP/肽复合物1的HSP70/肽复合物、HSP90/肽复合物、Gp96/肽复合物中的任一种；所述经纯化的单一的HSP/肽复合物3是不同于所述经纯化的单一的HSP/肽复合物1和所述经纯化的单一的HSP/肽复合物2的HSP70/肽复合物、HSP90/肽复合物、Gp96/肽复合物中的任一种。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述肿瘤细胞裂解液来源于骨肿瘤，滑膜肿瘤，纤维肿瘤，巨细胞肿瘤，尤文氏瘤，或建株的肿瘤细胞。

5.通过前述权利要求中任一项所述方法制备的纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗。

6.根据权利要求5所述的纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗在制备用于抑制肿瘤生长的药物中的用途。

7.根据权利要求5所述的纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗在制备用于激活细胞因子IL-2、TNF-α、IFN-γ的药物中的用途。

8.根据权利要求5所述的纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗在制备用于增加CD4⁺/CD8⁺T细胞的药物中的用途。