[发明专利]一种高纯免疫球蛋白G的制备方法有效
申请号: | 201910770523.7 | 申请日: | 2019-08-20 |
公开(公告)号: | CN110872345B | 公开(公告)日: | 2020-09-01 |
发明(设计)人: | 吕茂民;武岳;孙珍珠;朱凤宣;梁梦雅;董秋瑛;屈洒洒;方迟;张梦君;李庆保 | 申请(专利权)人: | 中科世生(北京)医药科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K16/06;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18 |
代理公司: | 北京载博知识产权代理事务所(普通合伙) 11116 | 代理人: | 韦群 |
地址: | 102600 北京市大兴区中关村科技园*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高纯 免疫球蛋白 制备 方法 | ||
1.药用芦丁在制备UVC病毒灭活增强剂中的用途,所述UVC病毒灭活增强剂为用于高纯免疫球蛋白G生产过程中的UVC病毒灭活增强剂;所述UVC病毒灭活增强剂用于高纯免疫球蛋白G生产过程中的病毒灭活步骤中;所述制备高纯免疫球蛋白G生产过程包括:
(1)将动物血清原料用生理盐水稀释至蛋白质浓度≤40mg/mL;
(2)室温下加入饱和硫酸铵溶液至饱和度达到30%,离心或过滤去除杂蛋白沉淀物;
(3)收集离心上清液或过滤液,继续加入饱和硫酸铵溶液至饱和度达到50%,离心或过滤收集免疫球蛋白沉淀;
(4)免疫球蛋白沉淀用原料血清1-2倍的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液溶解,经板框压滤去除不溶性杂质,进一步获得含有精纯免疫球蛋白G的澄清溶液,并调整蛋白质含量为5-10mg/mL;
(5) 病毒灭活:向获得的澄清溶液中加入0.5g/L药用芦丁,将含有芦丁的精纯免疫球蛋白G澄清溶液流经螺旋状石英玻璃管,并接受UVC光照强度为500~5000μw/cm2,120~1200s 的辐照处理;
(6)离子交换层析获得高纯免疫球蛋白G溶液;
其中步骤(4)中溶解使用的是pH 6.9的40mM的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液;步骤(5)中向步骤(4)获得的澄清溶液中加入药用芦丁0.5g/L;并用UVC光照处理。
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