[发明专利]IgM纯化方法

说明书

本发明涉及抗体技术领域，具体而言，涉及一种IgM纯化方法，包括：a.提供包含IgM的样品；b.经至少一次蛋白质沉淀处理和至少一次蛋白质浓缩处理得到蛋白沉淀物；c.将所述蛋白沉淀物复溶，使用辛酸‑硫酸铵法去除杂蛋白得到包含所述IgM的粗提物；d.经疏水层析处理处理，收集穿透物；e.经羟基磷酸石灰石层析，收集洗脱物；以及f.经俘获IgG的亲和层析树脂纯化处理，收集穿透物。根据本发明如上所述方法纯化得到的组合物中IgM的纯度在95％以上，且产品稳定，冻存后不易出现沉淀，抗体活性好。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，具体而言，涉及一种IgM纯化方法。

背景技术

IgM(免疫球蛋白M)是由5个单体通过一个J链和二硫键连接成五聚体，分子量在5类免疫球蛋白中最大，为970kD，称为巨球蛋白(macroglobulin)。这种结构使免疫球蛋白M具有较多的抗原结合价，可以同时和数个靶细胞结合。因此，免疫球蛋白M在机体抗感染免疫中起主力抗体的作用。

IgM存在于血液和淋巴液中，通常是感染反应后产生的第一种抗体，可使其他免疫系统细胞破坏异物。虽然IgM的用途比较广泛，但要获得高纯度的IgM，还是比较困难的。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

简而言之，本发明涉及一种IgM纯化方法，包括：

a.提供包含IgM的样品；

b.经至少一次蛋白质沉淀处理和至少一次蛋白质浓缩处理得到蛋白沉淀物；

c.将所述蛋白沉淀物复溶，使用辛酸-硫酸铵法去除杂蛋白得到包含所述IgM的粗提物；

d.经疏水层析处理，收集穿透物；

e.经羟基磷酸石灰石层析处理，收集洗脱物；以及

f.经俘获IgG的亲和层析树脂纯化处理，收集穿透物。

本发明所提供的方法可重现性好，操作简单，根据本发明如上所述方法纯化得到的组合物中IgM的纯度在95％以上，且产品稳定，冻存后不易出现沉淀，交叉反应小，抗体活性好。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明一个实施例纯化物的HPLC检测结果图；

图2为本发明一个实施例中SDS-PAGE纯度分析的凝胶扫胶图。

具体实施方式

现将详细地提供本发明实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本发明。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本发明进行多种修改和变化而不背离本发明的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。

因此，旨在本发明覆盖落入所附权利要求的范围及其等同范围中的此类修改和变化。本发明的其它对象、特征和方面公开于以下详细描述中或从中是显而易见的。本领域普通技术人员应理解本讨论仅是示例性实施方式的描述，而非意在限制本发明更广阔的方面。

本发明涉及一种IgM纯化方法，包括：

a.提供包含IgM的样品；

b.经至少一次蛋白质沉淀处理和至少一次蛋白质浓缩处理得到蛋白沉淀物；

c.将所述蛋白沉淀物复溶，使用辛酸-硫酸铵法去除杂蛋白得到包含所述IgM的粗提物；