[发明专利]一种补血生乳制剂的检测方法

权利要求书

1.一种补血生乳制剂的检测方法，包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

分别称取王不留行黄酮苷、芍药苷、阿魏酸、柚皮苷、新橙皮苷、桔梗皂苷D、黄芪甲苷、甘草酸对照品，置于容量瓶中，加甲醇，超声溶解并定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

取定量补血生乳制剂，置锥形瓶或容量瓶中，加甲醇，超声或回流提取10～20min，放冷，取上清液，重复提取2-3次，合并上清液，减压浓缩至干，加入甲醇溶液定容，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得补血生乳制剂供试品溶液；

(3)HPLC-ELSD检测：

分别吸取步骤(1)和(2)所得的对照品溶液和供试品溶液，分别注入HPLC-ELSD色谱仪中进行测定；

其中，色谱条件为：色谱柱为C₁₈反相色谱柱；检测器为ELSD，漂移管温度：40℃；柱温为30～35℃；流动相A为0.1～0.2％甲酸水溶液，流动相B为乙腈，流速为0.8～1.2ml/min；分析时间52分钟；梯度洗脱，洗脱顺序如下表1：

表1梯度洗脱程序

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)对照品溶液的制备按照下述方法进行：

精密称取各对照品适量，置于容量瓶中，加甲醇，超声溶解并定容至刻度，制成分别含王不留行黄酮苷2500μg/ml、芍药苷2500μg/ml、阿魏酸2500μg/ml、柚皮苷2500μg/ml、新橙皮苷2500μg/ml、桔梗皂苷D 2500μg/ml、黄芪甲苷2500μg/ml、甘草酸2500μg/ml的溶液，即得。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)供试品溶液的制备按照下述方法进行：

补血生乳制剂供试品溶液的制备：

a、补血生乳制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂：取补血生乳制剂内容物，研细，精密称取1-2g，置锥形瓶或容量瓶中，加入30-40mL甲醇，超声10-15min，取上清液，重复提取2-3次，合并上清液，减压浓缩至干，加入1mL甲醇溶解定容，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得补血生乳制剂供试品溶液；

b、补血生乳制剂为合剂、口服液：取补血生乳制剂混匀，精密量取5～10ml，置25～100ml容量瓶中，加甲醇，超声或回流提取10～20min，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得补血生乳制剂供试品溶液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，进样量为10μL。

5.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中超声处理时间为10分钟。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中的色谱柱是Diamonsil C18色谱柱，色谱柱规格为：250x4.6 mm，5μm。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中流动相A为0.1％甲酸水溶液。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中流速为1.0ml/min。