[发明专利]基于C18的ASE法建立养殖鱼中19种磺胺类残留的UPLC-MSMS检测方法

权利要求书

1.基于C18的ASE法建立养殖鱼中19种磺胺类残留的UPLC-MSMS检测方法，通过ASE法对养殖鱼样品进行萃取，萃取液冷冻后经氮吹复溶，采取UPLC-MS/MS法进行检测；

其中，所述19种磺胺类残留包括磺胺醋酰、磺胺吡啶、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲唑、磺胺甲噻二唑、苯甲酰磺胺、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺喹恶啉、磺胺间甲恶唑、磺胺二甲异唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺二甲氧嗪、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺苯吡唑；

所述ASE法的步骤为：将养殖鱼样品填入萃取池，设置萃取条件，萃取液在-15至-25℃冷冻30-60min，离心，上清液经氮吹扫50-150s，利用0.1%甲酸乙腈溶液复溶，过0.22μm滤膜，待UPLC-MS/MS检测；所述萃取池中在装样前放置1-2张过滤片，过滤片铺上C18填料；所述萃取条件为：萃取剂为含有5-20mg/L酒石酸铵的1%甲酸乙腈溶液，萃取剂体积为池容积的50-70%，萃取温度为60-80℃，萃取压力为1000-2000psi，加热时间为3-6min，静态萃取时间为1-3min，循环次数为1-3次；所述19种磺胺类残留在5、10、15μg/kg加标浓度下，加标回收率为80.3-108.6%，相对标准偏差为3.2-10.5%；

所述UPLC参数为：色谱柱：ACQUITY UPLC^TM BEH C18柱，2.1mm×100mm，1.7um；柱温：30-40℃；进样量：5-10μL；流速：0.2-0.5mL/min；初始流动相：95%A+5%B，梯度洗脱条件：2.0-8.0min，95%A-20%A，8.1min-10min，20%A-5%A；所述A为含0.1%甲酸5mM乙酸铵水溶液或含0.1%甲酸水溶液，所述B为乙腈；

所述MS/MS条件为：离子源：ESI+、正离子扫描；采集方式：动态多反应监测模式；毛细管电压：1.70-1.75V；离子源温度：140-160℃；脱溶剂气温度：340-360℃；喷雾电压：3500-4500V；锥孔气流速：140-160L/h；脱溶剂气流速：600-700L/Hr。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述检测方法还包括19种磺胺类残留混合标准溶液的配制，具体步骤为：

S1：将各磺胺类抗生素标准品用甲醇配制成质量浓度为1mg/mL的单标准储备液；

S2：将所述各单标准储备液混合，用甲醇稀释成质量浓度为1μg/L的混合标准储备液；

S3：将所述混合标准储备液用初始流动相稀释，即得到19种磺胺类残留混合标准溶液。