[发明专利]一种阿尼芬净原料药细菌内毒素的检测方法

权利要求书

1.一种阿尼芬净原料药细菌内毒素的检测方法，其特征在于该方法将阿尼芬净原料药用四氢呋喃溶解，制成阿尼芬净初溶液,再用细菌内毒素检查用水倍比稀释制备各灵敏度鲎试剂对应的阿尼芬净溶液，制成浓度为0.04mg/ml-0.34mg/ml的阿尼芬净溶液，然后参照《中国药典》2015年版四部1143细菌内毒素检查法中的凝胶法检查。

2.根据权利要求1所述的阿尼芬净原料药细菌内毒素的检测方法，其特征在于所述四氢呋喃用经0.22μm的除菌滤膜过滤。

3.根据权利要求1所述的阿尼芬净原料药细菌内毒素的检测方法，其特征在于所述阿尼芬净初溶液浓度为1.3mg/ml-11.0mg/ml。

4.根据权利要求1所述的阿尼芬净原料药细菌内毒素的检测方法，其特征在于该方法具体操作如下：

步骤一：阿尼芬净溶液制备:取阿尼芬净原料药，精密称定，加入经0.22μm的除菌滤膜过滤的四氢呋喃，使阿尼芬净充分溶解，制成浓度为1.3mg/ml-11.0mg/ml的溶液作为初溶液，用细菌内毒素检查用水倍比稀释32倍以上，制成浓度为0.04mg/ml-0.34mg/ml的阿尼芬净溶液；

步骤二：取灵敏度复核合格的λ为0.06 EU/ml -0.5 EU/ml的鲎试剂进行试验，每支鲎试剂用0.1ml检查用水复溶，8支试管，取2支加入0.1ml内毒素标准溶液（2λ），作为阳性对照，取2支加入0.1ml细菌内毒素检查用水作为阴性对照，2支加入0.1ml阿尼芬净溶液，2支加入0.1ml含2λ细菌内毒素的阿尼芬净溶液；

步骤三：轻轻混匀后封闭试管管口垂直放入36-38℃的恒温箱内保温58-62分钟，反应结束将试管从恒温箱中取出，缓缓倒转180°观察记录，试管内形成凝胶且不变形不从试管壁滑落者为阳性，未形成凝胶或形成凝胶不坚实、变形并从试管壁滑落者为阴性；

步骤四：结果判断：当阳性对照试管均为阳性，阴性对照试管为阴性，阿尼芬净溶液阳性试管为阳性，试验有效；阿尼芬净溶液2试管均为阴性时，阿尼芬净溶液内毒素符合规定，阿尼芬净溶液的2试管均为阳性时，则供试品不符合规定，若供试品溶液的2试管中一试管为阴性，一试管为阳性，需进行复试，复试时平行做4试管，若所有平行试管均为阴性，则阿尼芬净溶液符合规定，否则阿尼芬净溶液不符合规定。