[发明专利]抗病原体感染用靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗有效
| 申请号： | 201910779637.8 | 申请日： | 2019-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN110327459B | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 龚海燕;蔺智兵;韦娜娜;陈兆国;陆金苗 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院上海兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心上海分中心） |
| 主分类号： | A61K39/018 | 分类号： | A61K39/018;A61P33/02;C12N15/62;C12N15/70;C07K19/00 |
| 代理公司： | 上海段和段律师事务所 31334 | 代理人： | 陈少凌;郭国中 |
| 地址： | 201100 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抗病 原体 感染 靶向 免疫 检查点 pd l1 融合 疫苗 | ||
1.一种靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗，其特征在于，在巴贝斯虫基因Profilin的C末端连接PD-L1 Igv样结构域，融合表达，制得重组蛋白Pro-PDL1E，即所述疫苗。
2.根据权利要求1所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗，其特征在于，所述巴贝斯虫基因Profilin的DNA序列如SEQ ID NO.1所示，蛋白序列如SEQ ID NO.2所示。
3.根据权利要求1所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗，其特征在于，所述PD-L1Igv样结构域的DNA序列如SEQ ID NO.3所示，蛋白序列如SEQ ID NO.4所示。
4.根据权利要求1所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗，其特征在于，所述融合包括如下步骤：
S1、在巴贝斯虫基因Profilin的C末端通过linker（GGGS）3连接PD-L1的细胞外 IgV 样结构域，构成Pro-PDL1E融合序列，并连接到pMD-18T载体；
S2、以步骤S1构建于pMD-18T载体的Pro-PDL1E融合片段为模板，通过PCR与酶切酶连将融合片段插入载体pGEX-6p-1，形成带GST标签的Pro-PDL1E重组质粒；
S3、所述Pro-PDL1E重组质粒经转化在大肠杆菌BL21菌株中表达，诱导，纯化得到所述重组蛋白Pro-PDL1E。
5.根据权利要求4所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗，其特征在于，步骤S2中，PCR使用的引物为如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示的引物对。
6.根据权利要求4所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗，其特征在于，步骤S3中，所述诱导是采用1mMIPTG进行诱导。
7.根据权利要求4所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗，其特征在于，步骤S3中，所述纯化是用AKTA蛋白纯化系统进行纯化。
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