[发明专利]抗病原体感染用靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗有效

专利信息
申请号: 201910779637.8 申请日: 2019-08-22
公开(公告)号: CN110327459B 公开(公告)日: 2022-07-01
发明(设计)人: 龚海燕;蔺智兵;韦娜娜;陈兆国;陆金苗 申请(专利权)人: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
主分类号: A61K39/018 分类号: A61K39/018;A61P33/02;C12N15/62;C12N15/70;C07K19/00
代理公司: 上海段和段律师事务所 31334 代理人: 陈少凌;郭国中
地址: 201100 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 抗病 原体 感染 靶向 免疫 检查点 pd l1 融合 疫苗
【权利要求书】:

1.一种靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗,其特征在于,在巴贝斯虫基因Profilin的C末端连接PD-L1 Igv样结构域,融合表达,制得重组蛋白Pro-PDL1E,即所述疫苗。

2.根据权利要求1所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗,其特征在于,所述巴贝斯虫基因Profilin的DNA序列如SEQ ID NO.1所示,蛋白序列如SEQ ID NO.2所示。

3.根据权利要求1所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗,其特征在于,所述PD-L1Igv样结构域的DNA序列如SEQ ID NO.3所示,蛋白序列如SEQ ID NO.4所示。

4.根据权利要求1所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗,其特征在于,所述融合包括如下步骤:

S1、在巴贝斯虫基因Profilin的C末端通过linker(GGGS)3连接PD-L1的细胞外 IgV 样结构域,构成Pro-PDL1E融合序列,并连接到pMD-18T载体;

S2、以步骤S1构建于pMD-18T载体的Pro-PDL1E融合片段为模板,通过PCR与酶切酶连将融合片段插入载体pGEX-6p-1,形成带GST标签的Pro-PDL1E重组质粒;

S3、所述Pro-PDL1E重组质粒经转化在大肠杆菌BL21菌株中表达,诱导,纯化得到所述重组蛋白Pro-PDL1E。

5.根据权利要求4所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗,其特征在于,步骤S2中,PCR使用的引物为如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示的引物对。

6.根据权利要求4所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗,其特征在于,步骤S3中,所述诱导是采用1mMIPTG进行诱导。

7.根据权利要求4所述的靶向免疫检查点PD-L1的融合疫苗,其特征在于,步骤S3中,所述纯化是用AKTA蛋白纯化系统进行纯化。

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