[发明专利]解脲脲原体的检测方法及试剂盒在审
申请号: | 201910780063.6 | 申请日: | 2019-08-22 |
公开(公告)号: | CN112410442A | 公开(公告)日: | 2021-02-26 |
发明(设计)人: | 林彦青;孙琴;杨传忠 | 申请(专利权)人: | 深圳市妇幼保健院 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/06 |
代理公司: | 广州广典知识产权代理事务所(普通合伙) 44365 | 代理人: | 顾书玲 |
地址: | 518028 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 解脲脲 原体 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种解脲脲原体的检测试剂盒,其特征在于,包括针对uif基因的引物和探针,所述引物为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2,探针为SEQ ID NO.3,所述探针标记有荧光。
2.根据权利要求1所述的解脲脲原体的检测试剂盒,其特征在于,还包括阴性质控,所述阴性质控为灭菌生理盐水。
3.根据权利要求1所述的解脲脲原体的检测试剂盒,其特征在于,还包括阳性对照,所述阳性对照为解脲脲原体cDNA模板。
4.根据权利要求1-3任一项所述的解脲脲原体的检测试剂盒,其特征在于,还包括ddPCR反应缓冲液,热启动Taq酶和UNG酶。
5.一种非诊断目的的解脲脲原体的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取样本中的DNA并测定其浓度;
(2)运用权利要求1-4任一项所述试剂盒,进行ddPCR检测样本中解脲脲原体uif基因的拷贝数。
6.根据权利要求5所述的非诊断目的的解脲脲原体的检测方法,其特征在于,所述ddPCR的退火温度为55~59℃。
7.根据权利要求6所述的非诊断目的的解脲脲原体的检测方法,其特征在于,所述ddPCR的退火温度为55℃。
8.根据权利要求5所述的非诊断目的的解脲脲原体的检测方法,其特征在于,所述探针在ddPCR的反应体系中,终浓度为0.2~0.3mmol/L,和/或所述引物SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2在ddPCR的反应体系中的终浓度分别为0.9~1.1mmol/L。
9.根据权利要求8所述的非诊断目的的解脲脲原体的检测方法,其特征在于,所述探针在ddPCR的反应体系中,终浓度为0.25mmol/L,和/或所述引物SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2在ddPCR的反应体系中的终浓度分别为1mmol/L。
10.根据权利要求5-8任一项所述的非诊断目的的解脲脲原体的检测方法,其特征在于,步骤(1)所述的样本为咽拭子分泌物。
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