[发明专利]一种以朱顶红鳞茎盘为外植体获取再生植株的组培方法

说明书

本发明提供了一种以朱顶红鳞茎盘为外植体获取再生植株的组培方法，包括以下步骤：首先进行外植体选择，然后进行消毒，消毒后将鳞茎视大小切分为8‑12块，接种于诱导培养基中进行不定芽诱导，控制培养温度在24‑26℃，然后在光照时间10‑14h/天、光照强度为2000‑2200lx下进行正常培养45天，增殖出的小鳞茎切去叶子和根，接着将所得不定芽发育的幼苗切割转入继代培养基中进行培养25‑35天，最后将无菌苗接入生根培养基中进行生根培养15‑25天。通过该方法能够有效的解决朱顶红新品种离体快速繁殖的问题。

技术领域

本发明涉及朱顶红（Hippeastrum rutilum）组织培养繁殖方法，具体涉及一种以朱顶红鳞茎盘为外植体获取再生植株的组培方法，属于草本观赏植物种苗繁殖的技术领域。

背景技术

朱顶红（Hippeastrum rutilum）是石蒜科朱顶红属的一种。多年生草本植物。鳞茎近球形，叶6-8枚，花后抽出，鲜绿色，花茎中空，稍扁，具有白粉；花被管绿色，圆筒状，花被裂片长圆形，顶端尖，颜色因品种而异，喉部有小鳞片。

目前朱顶红品种非常丰富，市场占有以荷兰进口种球为主。荷兰朱顶红特征是花大色艳，叶片鲜绿洁净，是大众喜爱的盆栽观赏花卉及切花材料。但因繁殖技术问题，优良品种种球在国内培育的数量非常少，相关研究表明朱顶红属植物品种在自然状态下分球繁殖系数很低，而种子繁殖无法保证花色的遗传性状，因此作为优异的家庭园艺花卉，荷兰朱顶红资源紧缺，其推广应用受到了限制。

有关荷兰朱顶红及其同属植物的组织培养，国内鲜有报道。邹水平等以双龙朱顶红的小鳞茎为外植体进行离体快繁，繁殖系数达到1.2倍（朱顶红组培苗小鳞茎切割诱导新植株技术研究，湖南农业科学， 2012年第4期，5-7页）。刘铎以舞蹈皇后品种鳞茎盘为外植体，以MS+6-BA 2mg/L +NAA1.0 mg/L为不定芽诱导培养基进行组培繁殖，获得了2.4倍的繁殖系数（朱顶红快繁无菌体系建立的研究，现代园艺，2018年第3期，23-25页）。张慧等以仙女品种组培苗鳞茎盘为外植体，诱导愈伤组织，进而进行不定芽分化诱导，从而获得增殖率7.83株/瓶的繁殖体系（朱顶红愈伤组织诱导及增殖发育体系的建立及优化，山东林业科技，2018年第6期，17-20页）。以往研究均得到了朱顶红的增殖培养基和生根培养基，多以鳞茎盘为外植体，但增殖率相对比较低；而愈伤增殖途径的不定芽分化效率在生产上易出现不稳定现象。通过摸索激素种类、配比配方和切分方法，可增加组培苗繁殖系数，短周期内获得高效率的种苗繁殖。

综上所述，采取高繁殖系数的组织培养繁殖方法，是解决种球荷兰进口朱顶红种球短缺的重要途径之一，对其开发和推广利用都具有着非常重要的意义。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种以朱顶红鳞茎盘为外植体获取再生植株的组培方法。

为了达到上述目的，本发明采用如下的技术方案：

一种以朱顶红鳞茎盘为外植体获取再生植株的组培方法，其包括如下步骤：

步骤1）外植体选择与消毒；

步骤2）不定芽的诱导：取消毒后的外植体，切分为8-12块，保留0.5-1.0cm长度鳞茎，将外植体接种于诱导培养基中进行不定芽诱导培养，控制培养温度在24-26℃；

步骤3）继代培养与增殖：将步骤2）诱导得到的朱顶红不定芽苗接入继代培养基中，进行继代培养25-35天，培养温度24-26℃，光照时间10-14h/天，光照强度为1600-1800lx；任选地，再进行1-2次继代培养；

步骤4）根的诱导：将继代培养所得朱顶红试管苗切去叶子和须根，接入生根培养基中进行生根培养15天，培养温度24-26℃，光照时间10-14h/天，光照强度为1600-1800lx。