[发明专利]一种基于CeO2

说明书

本发明涉及一种基于CeO₂@SnS₂促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法，属于新型纳米材料领域与生物传感技术领域；本发明基于电致化学发光ECL技术，首次以铁蛋白共价交联鲁米诺（Ft‑luminol）作为信号源，以CeO₂@SnS₂作为促进剂，利用CeO₂@SnS₂对鲁米诺优异的协同催化作用对检测信号进行有效放大，提出了一种制备简单、成本低、反应能耗低、绿色环保的生物传感器制备方法，并将其应用于降钙素原的实际样品检测，检出限低至1.6 fg/mL，线性范围宽至5 fg/mL‑100 ng/mL，灵敏度高、重现性好，具有较大的潜在应用价值。

技术领域

本发明属于新型纳米材料领域与生物传感技术领域

背景技术

作为一门由生物、化学、医学、电子技术等多种学科相互交叉而兴起的研究热点，电致化学发光（ECL）免疫分析技术是电化学、化学发光以及免疫分析技术的有机结合，具有成本低、选择性好、灵敏度高、分析速度快，易于自动化、微型化与集成化等优点，已被广泛应用于疾病标志物分析、食品安全分析、环境污染分析等领域。

降钙素原作为诊断脓毒症和鉴别严重细菌感染的疾病标志物，它的灵敏检测可显著提高脓毒症诊断的敏感性和特异性。目前，用于检测降钙素原的主要是电化学生物传感器，但这种方法存在重现性差、灵敏度低的缺点。由于电致化学发光技术结合了化学发光与电化学两种技术的优势，除了具有易于操作、可控性强、响应速度快等特点，其灵敏度也要比电化学更高，检测限也更低，可见，基于电致化学发光技术制备的生物传感器具备了比电化学技术更强的优势，这为免疫新方法的提出提供了一种更为强有力的技术支持，本发明正是基于电致化学发光技术而提出的一种生物传感器的制备方法，旨在为弥补现有检测方法的不足，为降钙素原的早期临床检测提供一种全新的分析方法。

发明内容

本发明的技术任务之一是为了弥补现有检测技术的不足，提供一种以CeO₂@SnS₂促进鲁米诺电致化学发光的免疫传感技术，该技术操作简单、成本低、信号响应迅速，大大缩短了检测的时间，省时省力。

本发明的技术任务之二是提供所述生物传感器的用途，该传感器能够快速检测降钙素原，具有灵敏度高、特异性强、重现性好的优点，检出限为1.6 fg/mL，线性范围5 fg/mL-50 ng/mL。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种基于CeO₂@SnS₂促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法，包括以下步骤：

（1）将直径为4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，用超纯水冲洗干净；

（2）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为2 ~ 4 mg/mL的CeO₂@SnS₂材料溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；

（3）滴加6 μL、浓度为2 ~ 4 mg/mL的抗体标记的鲁米诺-铁蛋白（Ft-luminol）溶液，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；

（4）滴加3 μL、质量分数为1 ~ 3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；

（5）滴加6 μL 降钙素原的标准溶液或未知浓度的降钙素原溶液，37 °C下孵化0.5~ 2 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。