[发明专利]溶藻弧菌高效裂解性噬菌体vB_ValM-Yong3及其应用

说明书

本发明公开了一种溶藻弧菌高效烈性噬菌体vB_ValM‑Yong3及其应用，涉及溶藻弧菌污染和感染的生物处理。vB_ValM‑Yong3保藏于微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18192。vB_ValM‑Yong3的基因组为双链DNA，全长为42534bp，其序列不存在于已有数据库中，是一株未被报导的新的噬菌体。vB_ValM‑Yong3基因组含有54个ORF，不编码毒素和抗生素抗性基因。vB_ValM‑Yong3对动物有明显的保护作用。vB_ValM‑Yong3的应用，用于特异性地抑制、杀死高致病性溶藻弧菌。

技术领域

本发明涉及一种病原菌的噬菌体，尤其是涉及一种溶藻弧菌高效烈性噬菌体vB_ValM-Yong3及其应用。

背景技术

长期以来人类广泛使用抗生素和化学试剂用于疾病控制和消毒剂。滥用抗生素使细菌产生耐药性，超级细菌不断产生，严重威胁人类和动物健康；抗生素和消毒剂没有专一性，破坏我们依赖的正常菌群，损害健康并危害环境的微生态平衡；养殖产品中残留的抗生素等残留药物一旦被人体摄入，会影响肠道细菌群落、抑制免疫系统，危害人类健康。

噬菌体(phage)是感染细菌、真菌的病毒。根据生命周期的不同，噬菌体可以分为裂解性噬菌体(lytic phage)和温和性噬菌体(temperate phage)。裂解性噬菌体又可以称为烈性噬菌体或者毒性噬菌体(virulentphage)。裂解性噬菌体进入宿主菌体内后，开始了自己的生命循环，进行不断地复制、增殖得到大量的子代噬菌体，宿主菌被裂解；温和性噬菌体进入宿主菌后，将自身的基因组整合于宿主菌的基因组中，并随着宿主菌的不断分裂传递给子代。噬菌体安全性高，是最具潜力的抗生素替代品。烈性噬菌体在抗菌药物研发方面具有巨大的潜力和优势。烈性噬菌体特异性侵染目标细菌，将其裂解，并且不感染人和动、植物，也不会对正常微生物群落和环境造成污染，噬菌体具有宿主依赖性，随宿主的清除而消亡，不会残留在动物体内。

溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是一种噬盐性革兰氏阴性短杆菌，无芽孢、荚膜，隶属于弧菌科(Vibrionaceae)、弧菌属(Vibrio)，是一种常见的海洋致病菌，在世界各地海水及河口处广泛分布，并且其数量居海水类弧菌之首。可对人引起伤口感染、食物中毒、中耳炎等疾病。同时，它也是鱼、虾贝等海水养殖动物的一种条件致病菌，当环境恶化时机体免疫机能下降，溶藻弧菌病容易爆发，特别当水温在25-32℃下容易流行，因此养殖动物的溶藻弧菌病多发生在夏季，爆发时往往会造成水产养殖业巨大经济损失。因此，研发能够高效裂解溶藻弧菌的噬菌体具有重要的现实意义。宁波大学王春琳课题组从发病梭子蟹分离了一株高致病性溶藻弧菌WY，是梭子蟹特别是蟹苗的重要致病菌。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种可高效、快速地裂解高致病性溶藻弧菌的噬菌体及其应用。该噬菌体特异性感染、裂解高致病性溶藻弧菌，对动物有保护作用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种以高致病性溶藻弧菌WY为靶标分离获得的特异侵染溶藻弧菌的裂解性噬菌体，依据噬菌体命名原则命名为vB_ValM-Yong3(即Virus of bacteria，Vibrio alginolyticus，Myoviridae，Yong(甬)的缩写)，分类上属于肌尾科Myoviridae。于2019年7月10日保藏于微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18192，保藏机构地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101。噬菌体vB_ValM-Yong3对动物有保护作用，对三疣梭子蟹幼苗的相对保护率为29.1％。