[发明专利]哈维氏弧菌高效裂解性噬菌体vB_VhaS-yong 2及其应用

说明书

本发明公开了一种哈维氏弧菌高效裂解性噬菌体vB_VhaS‑yong 2及其应用，涉及哈维氏弧菌污染和感染的生物处理。vB_VhaS‑yong 2保藏于微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18194。vB_VhaS‑yong 2头部直径约为69nm nm，尾部长度约为195nm。vB_VhaS‑yong 2的基因组为双链DNA，全长为86660_bp，其序列不存在于已有数据库中，是一株未被报导的新的噬菌体，其基因组含有120个ORF。vB_VhaS‑yong 2对动物有明显的保护作用。vB_VhaS‑yong 2的应用，用于特异性地抑制、杀死高致病性哈维氏弧菌。

技术领域

本发明涉及一种病原菌的噬菌体，尤其是涉及一种哈维氏弧菌高效烈性噬菌体vB_VhaS-yong 2及其应用。

背景技术

为了防控疾病，抗生素和消毒剂被广泛使用。然而，滥用抗生素使细菌产生耐药性，超级细菌不断产生，严重威胁人类和动物健康；抗生素和消毒剂没有专一性，破坏我们依赖的正常菌群，损害健康并危害环境的微生态平衡；养殖产品中残留的抗生素等残留药物一旦被人体摄入，会影响肠道细菌群落、抑制免疫系统，危害人类健康。

噬菌体(phage)是感染细菌、真菌的病毒。根据生命周期的不同，噬菌体可以分为裂解性噬菌体(lytic phage)和温和性噬菌体(temperate phage)。裂解性噬菌体又可以称为烈性噬菌体或者毒性噬菌体(virulent phage)。裂解性噬菌体进入宿主菌体内后，开始了自己的生命循环，进行不断地复制、增殖得到大量的子代噬菌体，宿主菌被裂解；温和性噬菌体进入宿主菌后，将自身的基因组整合于宿主菌的基因组中，并随着宿主菌的不断分裂传递给子代。噬菌体安全性较高，是最具潜力的抗生素替代品。烈性噬菌体在抗菌药物研发方面具有巨大的潜力和优势。烈性噬菌体特异性侵染目标细菌，将其裂解，并且不感染人和动、植物，也不会对正常微生物群落和环境造成污染，噬菌体具有宿主依赖性，随宿主的清除而消亡，不会残留在动物体内。

哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)属于弧菌科，弧菌属。哈维氏弧菌广泛分布于养殖海水、浮游动植物体表、海底沉积物以及水产动物体内外。因宿主种类和自身健康状况差异的原因，感染哈维氏弧菌而呈现不同症状，如大黄鱼的“烂尾病”、花鲈的“体表溃烂病”和遮目鱼的“眼病”等。哈维氏弧菌可感染螃蟹等甲壳类动物，对虾的种苗、幼体和成体，而且发病率很高。在日本、印度、委内瑞拉、澳大利亚、美国南部以及中国(包括台湾)等国家和地区，哈维氏菌是养殖对虾最主要的病原菌，对虾被感染后一般会出现红眼、肌肉白浊等症状，对虾苗期和动物幼体常被感染，死亡率几乎达100％。成虾感染哈维氏菌后主要症状表现为胰腺、心脏、淋巴器官的坏死、出现发光病等。哈维氏弧菌和溶藻弧菌是梭子蟹育苗期的主要致病性病原，往往给养殖业带来惨重的损失。研发能够高效裂解哈维氏弧菌的噬菌体具有重要的现实意义。宁波大学李登峰课题组从发病梭子蟹分离了一株高致病性哈维氏弧菌LDF，是梭子蟹幼体、幼苗的主要致病菌。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种可高效、快速地裂解哈维氏弧菌的噬菌体及其应用。该噬菌体特异性感染、裂解哈维氏弧菌。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种以致病性哈维氏弧菌LDF株为靶标分离获得的特异侵染哈维氏弧菌的裂解性噬菌体，依据噬菌体命名原则命名为vB_VhaS-yong 2(即Virus of bacteria，Vibrio harveyi，Siphoviridae的缩写)，分类上属于长尾科Siphoviridae。vB_VhaS-yong 2于2019年7月10日保藏于微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18194，保藏机构地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101。