[发明专利]温和气单胞菌高效裂解性噬菌体vB_AsoP-yong及其应用

说明书

本发明公开了一种温和气单胞菌高效烈性噬菌体vB_AsoP‑yong及其应用，涉及温和气单胞菌污染和感染的生物处理。vB_AsoP‑yong保藏于微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17097。vB_AsoP‑yong1是首株以致病性温和气单胞菌LY‑23株为靶标分离获得的噬菌体vB_AsoP‑yong可专一性裂解温和气单胞菌，其最适MOI为0.001，潜伏期约为50min，裂解期为50min‑150min，爆发量为7665 PFU/Cell；对温度、pH、氯仿等因素有着较好的耐受能力；对动物有保护作用。

技术领域

本发明涉及一种病原菌的噬菌体，尤其是涉及一种温和气单胞菌高效烈性噬菌体vB_AsoP-Yong及其应用。

背景技术

为了防控疾病，抗生素和消毒剂被长期、广泛使用。然而，滥用抗生素使细菌产生耐药性，超级细菌不断产生，严重威胁人类和动物健康；抗生素和消毒剂没有专一性，破坏我们依赖的正常菌群，损害健康并危害环境的微生态平衡；养殖产品中残留的抗生素等残留药物一旦被人体摄入，会影响肠道细菌群落、抑制免疫系统，危害人类健康。

噬菌体(phage)是感染细菌、真菌的病毒。根据生命周期的不同，噬菌体可以分为裂解性噬菌体(lytic phage)和温和性噬菌体(temperate phage)。裂解性噬菌体又可以称为烈性噬菌体或者毒性噬菌体(virulent phage)。裂解性噬菌体进入宿主菌体内后，开始了自己的生命循环，进行不断地复制、增殖得到大量的子代噬菌体，宿主菌被裂解；温和性噬菌体进入宿主菌后，将自身的基因组整合于宿主菌的基因组中，并随着宿主菌的不断分裂传递给子代。噬菌体安全性高，是最具潜力的抗生素替代品。烈性噬菌体在抗菌药物研发方面具有巨大的潜力和优势。烈性噬菌体特异性侵染目标细菌，将其裂解，并且不感染人和动、植物，也不会对正常微生物群落和环境造成污染，噬菌体具有宿主依赖性，随宿主的清除而消亡，不会残留在动物体内。

温和气单胞菌(Aeromonas sobria)属于弧菌科，产气单胞菌属。其分布广泛，存在于淡水、污水、供水系统、土壤，食物尤其水产品中，可致使人、畜禽、鱼、甚至两栖类、爬行类动物患病。温和气单胞菌主要的毒力因子有溶血素、气溶素、细胞毒性肠毒素、脂酶和蛋白酶等外毒素。感染人类可导致的常见疾病有剧烈水样腹泻或慢性腹泻(持续10天或以上)、蜂窝性组织炎、败血症等，非常见疾病有肌肉溶解、出现坏疽、腹膜炎、败血症肺炎、胆囊炎和骨髓炎等。近年来，有许多水产动物感染温和气单胞菌的报道。温和气单胞菌感染鱼类，可引起内脏器官水肿、组织出血、溃烂等症状，往往给养殖业带来惨重的损失。研发能够高效裂解温和气单胞菌的噬菌体具有重要的现实意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种可特异、高效、快速地裂解致病性温和气单胞菌的噬菌体及其应用。该噬菌体特异性感染、裂解温和气单胞菌，对动物有保护作用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种以致病性温和气单胞菌LY-23株为靶标分离获得的特异侵染温和气单胞菌的裂解性噬菌体，命名为vB_AsoP-Yong(vB_AsoP 即Virus of bacteria，Aeromonas sobria，Podoviridae的缩写；Yong为株号代表“甬”)， vB_AsoP-Yong分类上属于短尾科Podoviridae。vB_AsoP-Yong于2019年1月22日保藏于微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17097，保藏机构地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101。vB_AsoP-Yong 对动物有保护作用，对锦鲫的相对保护率为30.1％。