[发明专利]一种矽肺病小鼠模型的制备方法

权利要求书

1.一种矽肺病小鼠模型制备方法，其特征在于：准备好实验所需的基本条件后，将正常成年 C57BL/6J 小鼠按完全随机的方法分为模型组和对照组，从常温动物饲养室中取出小鼠，模型组小鼠用异氟烷在麻醉机中进行麻醉，待小鼠由浅快呼吸转为深慢呼吸 3S 时取出置于掌心，大拇指指尖抵住小鼠下颌，用微量移液器经鼻滴入 SiO2 微米级颗粒混悬液，小鼠每吸入一滴，操作者滴下一滴， 直至全部滴完后，胸外按摩 2-3 分钟放入笼内，结束后立即将小鼠送回常温动物

饲养室；对照组小鼠只给予等体积的生理盐水滴鼻，胸外按摩 2-3 分钟结束后立即送回常温动物饲养室；实验前后获取小鼠的体重指标，分别在第 1 周、2 周、4 周、8 周、16周处死，取肺组织进行病理及生化对比鉴定，评价模型制备效果；

SiO2 晶体颗粒大小在 5um 以下公认的呼吸性细颗粒物大小，由华中科技大学提供，按照要求在实验前进行二次充分研磨后灭菌过滤使用；

生理盐水采用原装保质期内医用级别的无菌生理盐水，作为载体将 SiO2 晶体均匀分散在其中，保留多种浓度 0mg/ml-300mg/ml 的实验研究需求浓度。

2.根据权利要求 1 所述的一种矽肺病小鼠模型的制备方法，其特征在于： 所需造模基本条件有实验级别的常温动物饲养室及完整的配套用品，操作过程中所需的通风橱，小鼠定量麻醉机，高精度电子秤，200ul 移液器，1μm-5μm 左右的 SiO2 无菌晶体，无菌生理盐水。

3.根据权利要求 1 所述的一种矽肺病小鼠模型的制备方法，其特征在于： 正常成年C57BL/6J 小鼠周龄应在 7-8 周左右，体重在 18-23g，采用完全随机分组的方法分配实验组和对照组。

4.根据权利要求 1 所述的一种矽肺病小鼠模型的制备方法，其特征在于： 小鼠滴鼻前麻醉采用的是气体麻醉，麻醉剂选用异氟烷，观察指标为小鼠的呼吸节律即呼吸节律由浅快呼吸变为深慢呼吸 3 秒。

5.根据权利要求 1 所述的一种矽肺病小鼠模型的制备方法，其特征在于： 滴鼻操作前将小鼠横卧在持鼠手的掌横纹上，鼠头朝大拇指方向并枕靠在食指第二关节处，大拇指指尖轻轻抵住小鼠下颌，大拇指指腹抬起勿接触小鼠咽喉部， 四指轻轻保定住小鼠，防止滑落或移位。

6.根据权利要求 1 所述的一种矽肺病小鼠模型的制备方法，其特征在于： 滴鼻操作开始，将 SiO2 混悬液充分混匀后用移液器吸入 50-80μl，待小鼠完全

麻醉后取出滴鼻，移液器枪头对准小鼠一侧鼻翼而不是鼻尖，轻轻打出一滴，小鼠吸入后再打入下一滴，直至滴完，边滴边注意观察小鼠的呼吸状态，待完全滴完后进行胸外按摩和抚摸，确保生命体征恢复后放入笼内观察，实验全部结束后送回常温动物实验室饲养。

7.根据权利要求 1 所述的一种矽肺病小鼠模型的制备方法，其特征在于： 矽肺病小鼠模型的评价指标包括体重和体重丢失率，免疫印迹生化指标，ELISA 生化指标，肺病理指标如 HE 染色、马松染色、天狼猩红染色、免疫组化原位染色，小鼠肺组织提取分别在第 1周、2 周、4 周、8 周、16 周进行无痛处死后冰上操作。