[发明专利]一种矽肺病小鼠模型的制备方法

说明书

本发明涉及一种一种矽肺病小鼠模型制备方法，其特征在于：实验准备后，模型组小鼠用异氟烷在麻醉机中进行麻醉，待小鼠由浅快呼吸转为深慢呼吸3秒时取出置于掌心，大拇指指尖抵住小鼠下颌，用微量移液器经鼻滴入SiO2微米级颗粒混悬液，滴于鼻翼吸入，胸外按摩2‑3分钟放入笼内，结束后立即将小鼠送回常温动物饲养室；对照组小鼠只给予等体积的生理盐水滴鼻；实验前后获取小鼠的体重指标，分别在第1周、2周、4周、8周、16周处死，取肺组织进行病理及生化对比鉴定，评价模型制备效果。该方法造模技术稳定高效，可多次重复，无创环保人性化，节约人力和时间。

技术领域

本发明涉及实验技术领域，具体是一种矽肺病小鼠模型的制备方法。

背景技术

矽肺病是一种由长期暴露于粉尘环境中所引起的一种不可逆特发性肺纤维化职业性疾病。今年来，陶瓷、建筑材料、矿业开采等行业采取多种手段进行降尘和防护等预防措施，但矽肺病依然在职业人群中发生。现代能源与安全领域、矽尘职业病预防及临床治疗依然存在着众多亟待探索解决的重大临床疑难问题，迫切需要加强相关基础研究，如：矽肺病的病理变化机制、矽肺病治疗问题和矽肺病预防等。

临床和基础研究过程中，伦理和研究经费等问题一定程度制约了一些矽肺病方面的研究在患者或大型哺乳动物中的进行。因而，小鼠矽肺病模型的制备对于矽肺病的基础研究十分重要，并被广泛应用。

既往，小鼠矽肺病模型的制备主要是通过外科手术侵入的方法制备，感染风险难于控制，并且需要对小鼠进行深度注射麻醉，小鼠死亡率较高，实验的重复效果差。近年，有科研人员采用气管内滴注的方法制备，但该方法制作的矽肺模型存在以下缺点：①气道侵入会对小鼠的气道产生损伤环节，增加了诱发矽肺病产生的外部因素；②气道内的滴注不符合小鼠呼吸的节律，操作中会出现小鼠呼吸顺应性差的现象，增加死亡风险；③气道滴入存在误入食道的可能性，增加实验的失败率。到目前为止，尚未有一种操作安全、重复性好、损伤和纤维化结局均可以精确控制的小鼠矽肺病模型。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明提供一种有效的矽肺病小鼠模型的制备方法；该矽肺病小鼠模型制备方法有如下优点：1、非创伤式造模，避免了感染隐患和小鼠的身心创伤；2、顺应小鼠的呼吸节律，利用麻醉后的深呼吸，将SiO2 混悬液吸入肺内；3、符合职业病患者通过呼吸道吸入肺内的疾病发生的实际环节；4、可重复性好，可以通过此方法多次给药，研究不同频率对矽肺病发生的影响；5、性价比高，小鼠容易获取、操作简便、一次可获得大量的观察指标和样本量；6、安全性高，按照本说明书的剂量和办法可以大大降低造模小鼠的死亡风险和人的安全隐患等。

本发明实现发明目的采用如下技术方案：

一种矽肺病小鼠模型的制备方法，将正常成年小鼠按完全随机的方法分为模型组和对照组，从常温动物饲养室中取出小鼠，模型组小鼠用异氟烷深麻醉，经鼻滴入SiO2微米级颗粒混悬液，胸外按摩2-3分钟，结束后立即将小鼠送回常温动物饲养室；对照组小鼠只给予生理盐水滴鼻，不滴SiO2混悬液，胸外按摩2-3分钟结束后立即送回常温动物饲养室；实验前后获取小鼠的体重指标，分别在第1周、2周、4周、8周、16周处死，取肺组织进行病理及生化对比鉴定，评价模型制备效果。

作为优选，本发明提供的一种矽肺病小鼠模型制备方法，所需造模基本条件有实验级别的常温动物饲养室及完整的配套用品，操作过程中所需的通风橱，小鼠定量麻醉机，高精度电子秤，200ul移液器，1μm-5μm左右的SiO2无菌晶体，无菌生理盐水；

作为优选，本发明提供的一种矽肺病小鼠模型制备方法，正常成年C57BL/6J 小鼠周龄应在7-8周左右，体重在18-23g，采用完全随机分组的方法分配实验组和对照组；

作为优选，本发明提供的一种矽肺病小鼠模型制备方法，小鼠滴鼻前麻醉采用的是气体麻醉，麻醉剂选用异氟烷，观察指标为小鼠的呼吸节律即呼吸节律由浅快变为深慢呼吸3秒；