[发明专利]一种定量检测地高辛的化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种定量检测地高辛的化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1、R2和R3，其中：试剂R1为包含链霉亲和素磁颗粒的悬浮液；试剂R2为包含化学发光标记物标记的地高辛单克隆抗体的溶液；试剂R3为包含偶联标记物标记的地高辛衍生物的溶液。本发明提供的试剂盒，针对地高辛是小分子物质，采用竞争法原理进行检测，节约时间及成本，具有免疫反应的高度特异性，又具有发光反应的高敏感性，具有灵敏度高、特异性强、线性范围宽、试剂稳定性好、操作简便、容易实现自动化的优点，本发明提供的制备方法，工艺简单，试剂盒有效期长，成本相对较低；方便实现快速检测，对于仪器的要求简单，便于实现全自动化操作。

技术领域

本发明涉及体外检测技术领域，尤其涉及一种定量检测地高辛化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

地高辛(Digoxin，或DIG)是一种从洋地黄中提取出来的中效强心苷类药物，为白色结晶或结晶性粉末，无臭，味苦。在治疗时，对心脏的作用表现为正性肌力作用，减慢心率，抑制心脏传导，适用于低输出量型充血性心力衰竭、心房颤动、心房扑动、阵发性室上性心动过速。这种积极的正性肌力作用使地高辛成为治疗心衰控制快速心室率临床首选的有效药物。

然而，地高辛有效血药浓度窄，未服药病人＜0.5ng/ml，根据2008年ESC急慢性心力衰竭诊断治疗指南推荐地高辛的治疗范围为0.6～1.2ng/m。此外，地高辛安全范围窄，治疗指数低，药动学、药效学个体差异大，且有治疗剂量与中毒剂量在一定程度上相互重叠的药动学特性，容易发生中毒反应。因此，地高辛是临床上需要做血药浓度监测的主要药物之一。在临床治疗过程中及时监测地高辛的血药浓度是调整给药方案、预防药物中毒的主要方法。

地高辛血药浓度常用监测方案主要包括液相-质谱联用分析法、放射免疫、酶联免疫吸附分析法和化学发光免疫法。其中，液相-质谱联用分析法所需仪器昂贵、操作繁琐、灵敏度较差、检测耗时较长，因此其临床应用受到限制；放射免疫分析法有检测时间较长，抗原标记物半衰期短，易受代谢物的干扰，存在不同程度的放射性污染等缺点，较难用于临床的即时测定；酶联免疫吸附分析法缺点主要是人为因素干扰检测结果，孵育时间长，酶稳定性降低，影响检测结果准确性。

化学发光免疫测定(CLIA)是继酶免技术、放免技术、荧光免疫技术和时间分辨荧光免疫技术之后发展的一项新兴免疫测定技术。由于它既具有免疫反应的高度特异性，又具有发光反应的高敏感性，近年来已被国内外临床实验室及科研单位广泛应用于各种激素、特种蛋白及药物的监测和分析。该方法具有灵敏度高、特异性强、线性范围宽、操作简便、试剂稳定性好、操作简便、容易实现自动化的优点，是理想的临床微量生化检验分析手段。

目前我国获准上市的临床检测地高辛(DIG)试剂盒检测原理主要以酶联免疫法(ELISA)和辣根过氧化物酶联合鲁米诺类化合物化学发光。虽然价格便宜但灵敏度和检测的可靠性得不到保证，而国外的检测系统价格昂贵难以普及。因此，需要开发出一种检测的灵敏度和精密度都很高，对于仪器的要求简单、方便，实现快速检测的地高辛(DIG)试剂盒。

发明内容

本发明针对上述技术问题，提供一种定量检测地高辛化学发光免疫检测试剂盒，定量检测血清或血浆中的地高辛(DIG)，灵敏度高、重复性好、成本低，为临床医师调整患者剂量从而获得最佳治疗效果提供有用信息，具有广泛市场前景。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：

本发明首先提供了一种定量检测地高辛的化学发光免疫检测试剂盒，包括试剂R1、R2和R3，其中：

试剂R1为包含链霉亲和素磁颗粒的悬浮液；

试剂R2为包含化学发光标记物标记的地高辛单克隆抗体的溶液；

试剂R3为包含偶联标记物标记的地高辛衍生物的溶液；

优选地，试剂R1中链霉亲和素磁颗粒质量百分比为0.01％～1％。