[发明专利]一种新型的测定生物样品中醛酮化合物的衍生化方法在审
申请号: | 201910795903.6 | 申请日: | 2019-08-27 |
公开(公告)号: | CN110551143A | 公开(公告)日: | 2019-12-10 |
发明(设计)人: | 李舒伟 | 申请(专利权)人: | 南京谱利健生物技术有限公司 |
主分类号: | C07D495/04 | 分类号: | C07D495/04;G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 32206 南京众联专利代理有限公司 | 代理人: | 李雪萍 |
地址: | 210033 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 醛酮 衍生化试剂 生物素 链霉亲和素蛋白 稳定同位素标记 高分辨质谱 生物素基团 特异性反应 选择性标记 定量分析 紫外光 待测样品 亲和富集 生物样品 同量异位 氨氧基 代谢物 共价键 衍生化 富集 裂解 羰基 标签 检测 分析 | ||
1.一种新型的衍生化试剂,其特征在于:衍生化试剂包括以下三部分:1)一个能够与羰基进行特异性反应形成共价键的氨氧基官能团;2)一个能够被光裂解的生物素基团用于标记后的醛酮化合物的亲和富集;3)一个含有稳定同位素标记的同量异位标签用于醛酮化合物的定量分析。
2.如权利要求1所述的一种新型的衍生化试剂,其特征在于:所述新型的衍生化试剂包括2~10个化学结构完全相同的分子,在每个分子中的同量异位标签的不同位置处含有13C或15N同位素。
3.如权利要求2所述的一种新型的衍生化试剂,其特征在于:所述同量异位标签的结构包括报告基团和平衡基团,其中报告基团和平衡基团是通过MS/MS可剪切键连接;所述同量异位标签的每个报告基团的质量是不同的,报告基团的不同质量被平衡基团所补偿,每个试剂中的报告基团加平衡基团的质量是相同的。
4.如权利要求2所述的一种新型的衍生化试剂,其特征在于:报告基团和平衡基团通过质谱MS/MS可剪切键连接,在串联质谱分析中被切断所形成的报告离子的强度用来定量分析。
5.如权利要求1或2所述的一种新型的衍生化试剂,其特征在于:所述衍生化试剂为包括10个分子的衍生化试剂,结构包括CILAT-10Plex114、CILAT-10Plex115C、CILAT-10Plex116C、CILAT-10Plex117C、CILAT-10Plex118C、CILAT-10Plex119、CILAT-10Plex115N、CILAT-10Plex116N、CILAT-10Plex117N、CILAT-10Plex118N;10个分子衍生化试剂的结构如下式:
6.如权利要求1或2所述的一种新型的衍生化试剂,其特征在于:所述衍生化试剂为包括两个分子的衍生化试剂,结构包括CILAT-2Plex114和CILAT-2Plex115两个分子;CILAT-2Plex114的位置1是13C,位置2是14N,CILAT-2Plex115的位置1是12C,位置2是15N;报告离子的质荷比分别为114.12和115.12,
衍生化试剂的结构如下式:
7.一种新型的衍生化试剂的应用,所述衍生化试剂用于测定生物样品中醛酮化合物的定性定量分析。
8.采用权利要求1-6所述的任意一种新型的衍生化试剂测定生物样品中醛酮化合物的衍生化方法,其特征在于:衍生化试剂分别和待测样品中的醛酮化合物反应后,混合在一起,然后利用生物素和链霉亲和素蛋白之间的强作用力富集含有同量异位标签的分子,最后用紫外光把生物素部分切断,产生的分子可以用高分辨质谱LC-MS/MS进行分析。
9.一种新型的衍生化试剂的应用,所述衍生化试剂用于测定一个生物样品中醛酮化合物的绝对含量。
10.如权利要求9所述的一种新型的衍生化试剂的应用,其特征在于:所述衍生化试剂的结构包括CILAT-2Plex114和CILAT-2Plex115两个分子,衍生化试剂用于测定一个生物样品中醛酮化合物的绝对含量的方法为:CILAT-2Plex115标记生物样品中的醛酮化合物,CILAT-2Plex116标记相应的经过精确测定浓度的醛酮化合物的标准品。
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