[发明专利]一种回输临床治疗用自体脂肪干细胞及其制备方法和应用在审
申请号: | 201910797504.3 | 申请日: | 2019-08-27 |
公开(公告)号: | CN110408593A | 公开(公告)日: | 2019-11-05 |
发明(设计)人: | 王显荣 | 申请(专利权)人: | 王显荣 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K35/28;A61P11/00;A61P13/00;A61P25/00 |
代理公司: | 北京知呱呱知识产权代理有限公司 11577 | 代理人: | 盛明星 |
地址: | 610041 四川省成*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 自体脂肪 干细胞 胶原酶 回输 制备方法和应用 磷酸盐缓冲液 体液样本 再生医学 沉降物 制备 抗生素 脂肪干细胞 恒温培养 临床治疗 抑制蛋白 沉降 产率 蛋白 合成 采集 分解 排斥 修复 | ||
1.一种回输临床治疗用自体脂肪干细胞的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(a)采集自体脂肪体液样本;
(b)将自体脂肪体液样本添加到含有抗生素、胶原酶的磷酸盐缓冲液中进行沉降并收集沉降物;
(c)在沉降物中添加含有胶原酶的磷酸盐缓冲液中进行恒温培养、离心,即得所述自体脂肪干细胞。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述自体脂肪体液样本的采集具体包括:
在患者臀部或大腿内侧设计采集部位,并采用微针在采集部位周围注射肿胀液,待麻醉后,在麻醉部位吸取自体脂肪体液样本。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述肿胀液由45%生理盐水12-18ml、肾上腺素0.3-0.7g和盐酸利多卡因8-12ml组成。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(b)中,自体脂肪体液样本的添加量与含有抗生素、胶原酶的磷酸盐缓冲液的体积比为1∶(0.8-1.2),所述含有抗生素、胶原酶的磷酸盐缓冲液中抗生素含量为0.8-1.2%;胶原酶含量为0.08-0.12%;磷酸盐缓冲液为pH6.5-7.0、0.08-0.12M的磷酸盐缓冲液。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(b)中,沉降时间为25-35min。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(c)中,含有胶原酶的磷酸盐缓冲液的添加量与自体脂肪体液样本的体积比为1∶(0.8-1.2);含有胶原酶的磷酸盐缓冲液中胶原酶的含量为0.08-0.12%;磷酸盐缓冲液为pH6.0-7.0、0.08-0.12M的磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(c)中,恒温培养温度为35-38℃,时间为50-70min。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(c)中,离心转速为1200-1800rpm,离心时间为8-12min。
9.一种回输临床治疗用自体脂肪干细胞,其特征在于,由权利要求1-8任一所述的制备方法制备得到。
10.权利要求9所述的自体脂肪干细胞在制备老化器官修复、组织细胞再生药物中的应用。
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