[发明专利]一种非蛋白氨基酸修饰的胶原蛋白抗氧化肽及其制备方法

说明书

本发明提出了一种非蛋白氨基酸修饰的胶原蛋白抗氧化肽的制备方法，以东海乌参胶原蛋白为原料，通过酶解、浓缩，得到高浓度胶原蛋白水解产物，加入一定量的磺基丙氨酸，在适宜条件下进行类蛋白反应获得非蛋白氨基酸修饰的胶原蛋白抗氧化肽。本发明新型多功能肽的制备方法，其反应效率高，合成耗时短，产物易纯化，降低了生产成本，预处理过的生物原料活性不受破坏，且产物活性能得到提升。

技术领域

本发明涉及抗氧化肽技术领域，具体涉及一种非蛋白氨基酸修饰的胶原蛋白抗氧化肽及其制备方法。

背景技术

非蛋白氨基酸具有与常见的二十种天然氨基酸不同的结构特征，如非α位氨基取代、氮甲基化、烷基取代、含卤素、羟基或磺基等取代基等等。这些结构上的差异导致了部分非蛋白氨基酸具有独特的生理活性。运用非蛋白氨基酸进行生物活性肽的结构修饰是一种非常有潜力和前景的修饰方法，已经发展出了许多有效的肽激动剂和拮抗剂。用L-噻唑烷-4-羧酸(Thp)和环己基丙氨酸(Cha)对多肽Ac-Asp-Glu-Glu-Thr-Gly-Glu-Phe-OH进行非蛋白氨基酸修饰，新的多肽Ac-Asp-Thp-Glu-Thr-Gly-Glu-Cha-OH抗氧化活性显著增强。非蛋白氨基酸也是进行构效关系研究的有效手段。含有非蛋白氨基酸的肽类似物与母体肽在高级结构、生理活性等方面的比较，使人们对受体-配体相互作用、分子识别、信息传递等方面的认识逐步深入。可以说运用非蛋白氨基酸对生物活性多肽进行化学修饰，研究其构效关系，进一步发展高效的肽类似物，已经成为多肽化学研究的重要手段和方向之一。然而，目前抗氧化肽的非蛋白氨基酸修饰相关的研究较少，不利于新型抗氧化肽的开发利用。

发明内容

本发明提供一种非蛋白氨基酸修饰的胶原蛋白抗氧化肽及其制备方法，其目的在于，提供一种非蛋白氨基酸修饰的胶原蛋白抗氧化肽，利用磺基丙氨酸修饰东海乌参胶原蛋白水解产物，形成胶原蛋白抗氧化肽，该活性生物肽具备磺基丙氨酸生物活性和东海乌参胶原蛋白的抗氧化活性，具有抗氧化、清除自由基、降血糖、抗肿瘤等多种生物活性功能。

本发明提供一种非蛋白氨基酸修饰的胶原蛋白抗氧化肽，包括：

A.天然多肽，其氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示；

B.结合在A限定的多肽上的、为进行修饰而导入的取代基；所述取代基为非蛋白氨基酸。

作为本发明进一步的改进，所述天然多肽为东海乌参胶原蛋白水解蛋白产物。

作为本发明进一步的改进，所述非蛋白氨基酸为磺基丙氨酸。

本发明进一步保护一种上述非蛋白氨基酸修饰的胶原蛋白抗氧化肽的制备方法，以东海乌参胶原蛋白为原料，通过酶解、浓缩，得到高浓度胶原蛋白水解产物，加入一定量的磺基丙氨酸，在适宜条件下进行类蛋白反应获得非蛋白氨基酸修饰的胶原蛋白抗氧化肽。

作为本发明进一步的改进，所述东海乌参胶原蛋白的制备方法如下：选用东海乌参作为原料，切碎，经过酸、碱和柠檬酸的浸泡，去除重金属和杂蛋白，得到粗胶原蛋白，向粗胶原蛋白溶液中加入氯化钠，离心，弃除上清液，固体经透析、冷冻干燥得到东海乌参胶原蛋白。

作为本发明进一步的改进，所述东海乌参胶原蛋白的酶解方法如下：向东海乌参胶原蛋白溶液中加入HCl溶液，调节pH至3-5，加入胃蛋白酶，适宜温度下酶解1-5h，灭活，离心，收集上清液。

作为本发明进一步的改进，所述浓缩的方法包括：冷冻干燥、喷雾干燥和减压水分蒸发，得到的高浓度胶原蛋白水解产物密度为2-3.5g/cm³。