[发明专利]一组基于特异性靶标鉴定单核细胞增生李斯特氏菌血清型的多重PCR引物及其应用

权利要求书

1.一组基于特异性靶标鉴定单核细胞增生李斯特氏菌血清型的多重PCR引物，其特征在于，包括LMOf2365_2361引物、lmo1083引物、lmo1119引物及lmo0733引物；

所述LMOf2365_2361引物包括正向引物LMOf2365_2361-F及反向引物LMOf2365_2361-R；所述正向引物LMOf2365_2361-F如SEQ ID NO:1所示，所述反向引物LMOf2365_2361-R如SEQ ID NO:2所示；

所述lmo1083引物包括正向引物lmo1083-F及反向引物lmo1083-R；所述正向引物lmo1083-F如SEQ ID NO:3所示，所述反向引物lmo1083-R如SEQ ID NO:4所示；

所述lmo1119引物包括正向引物lmo1119-F及反向引物lmo1119-R；所述正向引物lmo1119-F如SEQ ID NO:5所示，所述反向引物lmo1119-R如SEQ ID NO:6所示；

所述lmo0733引物包括正向引物lmo0733-F及反向引物lmo0733-R；所述正向引物lmo0733-F如SEQ ID NO:7所示，所述反向引物lmo0733-R如SEQ ID NO:8所示。

2.权利要求1所述的一组基于特异性靶标鉴定单核细胞增生李斯特氏菌血清型的多重PCR引物在鉴定单核细胞增生李斯特氏菌血清型中的应用。

3.根据权利要求2所述的一组基于特异性靶标鉴定单核细胞增生李斯特氏菌血清型的多重PCR引物在鉴定单核细胞增生李斯特氏菌血清型中的应用，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将待测样品进行增菌培养，获得增菌样品；

（2）提取步骤（1）所述增菌样品的基因组DNA；

（3）将步骤（2）所得的基因组DNA为模板DNA，采用所述LMOf2365_2361引物、lmo1083引物、lmo1119引物以及lmo0733引物进行PCR反应，获得PCR产物；

（4）将步骤（3）所述PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据电泳结果对步骤（1）所述样品进行单核细胞增生李斯特氏菌血清群判定；所述的电泳结果是以下情况之一：

a．有且仅有分子量大小为771bp和500bp的DNA条带，判定为单核细胞增生李斯特氏菌血清群IIa；

b. 有且仅有分子量大小为771bp、396bp和500bp的DNA条带，判定为单核细胞增生李斯特氏菌血清群IIb；

c. 有且仅有分子量大小为771bp、243bp和500bp的DNA条带，判定为单核细胞增生李斯特氏菌血清群IIc；

d. 有且仅有分子量大小为396bp和500bp的DNA条带，判定为单核细胞增生李斯特氏菌血清群IVb；

e. 有且仅有分子量大小为500bp的DNA条带，判定为单核细胞增生李斯特氏菌血清群L；

f. 无DNA条带，判定为非单核细胞增生李斯特氏菌。