[发明专利]一种抗乳腺癌纳米药物及其制备方法

权利要求书

1.一种抗乳腺癌的靶向性的T7-细胞膜-PLGA-柴胡皂苷D仿生纳米药的制备方法，其特征在于，所述纳米药的制备方法包括以下步骤：

1)取1×10⁶个细胞，用1×PBS洗涤3次；细胞悬浮在低温低渗裂解缓冲液中，并用聚碳酸酯膜微挤出机挤出20次，所得细胞匀浆在4℃条件下用3200g进行离心5min，收集上清液，再用20000g离心30min，留上清液，再用超速离心机，在80000g条件下离心1.5h；最后所得为纯化的细胞膜，保存在4℃，备用；其中,所述低温低渗裂解缓冲液的组成为20mM Tris-HCl，pH7.4；0.10mM MgCl₂；10mM KCl；胰蛋白酶裂解液；

2)4mg PLGA和1.56mg柴胡皂苷D溶解于200微升丙酮中，将该混合液逐滴加入到1mL水中，在水中迅速乳化，边加边用磁力搅拌器搅拌直至丙酮完全挥发，磁力搅拌器转速为900rpm，以12000rpm离心3次，每次离心30min来洗涤所合成的纳米药，最后把上清液保留在PBS中，得到纯化后的柴胡皂苷D-PLGA纳米核；

3)将1mM 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺混合并孵化30min，然后将浓度为1mM的T7肽加入到混合液中摇匀，摇动30min，加入二硬脂酰磷脂酰乙二醇氨基孵化12h后，以5000rpm离心两次，每次15min，除去未反应的T7肽、1mM 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺，即得T7肽偶联聚乙二醇化磷脂；

4)将步骤1)所得的细胞膜和步骤3)所得的T7肽偶联聚乙二醇化磷脂通过聚碳酸酯纤维膜物理挤压，最终形成含有T7的具有肿瘤细胞靶向性的囊泡，通过挤压囊泡，将步骤2)所得的柴胡皂苷D-PLGA纳米核包裹在其中，获得纳米药；

5)所述T7肽的序列为HAIYPRH。

2.一种根据权利要求1所述制备方法得到的抗乳腺癌的靶向性的T7-细胞膜-PLGA-柴胡皂苷D仿生纳米药。