[发明专利]一种p16免疫组化检测试剂盒

说明书

本发明涉及生物科技技术领域，具体为一种p16免疫组化检测试剂盒，包括一抗：冻干粉p16抗体；无色试剂：内源性过氧化物酶阻断剂10－15ml；试剂A：免疫组化封闭液；试剂B：生物素标记二抗工作液；试剂C：辣根酶标记链酶卵白素工作液；棕色显色液D液1－2ml；白色显色液E液20－25ml；0.1M PBS缓冲液；柠檬酸钠抗原修复液；二氨基联本胺DAB染色液。本发明利用链霉亲和素－生物素信号放大技术生产的免疫组化检测试剂，具有高灵敏度，特异性强、定性定位准确、背景清晰、低倍景染色，直接滴加，操作方便，孵育时间短，适用于冷冻切片、石蜡切片及固定的细胞涂片；可用于检测细胞、组织内的特异性抗原。

技术领域

本发明涉及生物科技技术领域，具体为一种p16免疫组化检测试剂盒。

背景技术

免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究。目前免疫组织化学已广泛应用与临床病理学诊断，特别是用针对性地抗体进行肿瘤辅助诊断和鉴别诊断，成为临床病理学诊断不可缺少的重要手段。

目前市面上的p16免疫组化检测试剂盒灵敏度低，特异性差、定性定位不准确、背景模糊、操作不方便，孵育时间太长。鉴于此，我们提供一种p16免疫组化检测试剂盒。

发明内容

本发明的目的在于提供一种p16免疫组化检测试剂盒，以解决上述背景技术中提出现如今p16免疫组化检测试剂盒灵敏度低，特异性差、定性定位不准确、背景模糊、操作不方便，孵育时间太长的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种p16免疫组化检测试剂盒，所述检测试剂盒中包括以下试剂：

一抗：冻干粉p16抗体；

无色试剂：内源性过氧化物酶阻断剂10－15ml；

试剂A：免疫组化封闭液；

试剂B：生物素标记二抗工作液；

试剂C：辣根酶标记链酶卵白素工作液；

棕色显色液D液1－2ml；

白色显色液E液20－25ml；

0.1M PBS缓冲液；

柠檬酸钠抗原修复液；

二氨基联本胺DAB染色液。

作为优选，所述检测试剂盒的实验步骤具体如下：

S1：制备一抗稀释液和DAB显色液；

S2：将石蜡切片，并进行脱蜡至水；

S3：蒸馏水冲洗，0.1M PBS缓冲液浸泡6－10min；

S4：进行抗原修复；

S5：采用3％－5％的无色双羊水去离子水孵育15－20min，消除内源性过氧物酶活性；

S6：滴加蓝色试剂A免疫组化封闭液，室温孵育15－20min；

S7：滴加S1中制备的一抗稀释液，35－37℃孵育2－3小时；

S8：采用0.1M PBS缓冲液冲洗，每一分钟冲洗一次，三分钟冲洗三次，之后滴加黄色试剂B生物素标记二抗工作液，30－37℃孵育15－20min；

S9：采用0.1M PBS缓冲液冲洗，每一分钟冲洗一次，三分钟冲洗三次，之后滴加橙色试剂C辣根酶标记链酶卵白素工作液，30－37℃孵育15－20min；

S10：通过DAB显色液显色，并通过自来水充分冲洗；