[发明专利]发酵法制备枸杞活性肽及方法和应用与抑制剂、功能食品

权利要求书

1.微生物发酵法制备枸杞活性肽的方法，其特征在于：提取枸杞中的蛋白质，制备枸杞蛋白提取物，利用微生物发酵枸杞蛋白提取物制备枸杞活性肽；

具体过程为：

(1)枸杞蛋白提取物的制备

以干枸杞为原料，称取枸杞并加入其8~20倍 (枸杞g/mL水)去离子水浸泡2~8小时后粉碎，超声提取20~60 min，于3000~8000 rpm离心10~20 min，沉淀用于提取枸杞蛋白；

沉淀冷冻干燥后再次粉碎得到枸杞粉；枸杞粉中加入其5~20倍(枸杞粉g/mL提取液)体积的有机溶剂提取液，于温度20~80 ℃、转速80~200 rpm搅拌提取0.5~2小时，去除液体，保留固体，重复提取过程2~4次，滤饼冷冻干燥后为枸杞蛋白；

(2)枸杞活性肽的制备

将枸杞蛋白加入其5~20倍 (枸杞蛋白g/mL水)去离子水，用1~5 M的氢氧化钠溶液调节pH至 7.2~7.5，接种微生物菌种，发酵液菌含量为 1*10⁶~2*10⁸ CFU/mL，于35~50 ℃发酵24~72小时；发酵结束后在9000~15000 rpm离心5~20 min，取上清液冷冻干燥，得到发酵粗提取物；

发酵粗提取物中加入其2~10倍体积 (发酵粗提取物g/mL盐酸)的0.01~0.1 M的盐酸，在0~8 ℃匀浆5~20 min后，于5000~15000 rpm离心10~30 min，取上清液加入1~5倍体积的无水乙醇，0~8 ℃静置24~48小时，于5000~15000 rpm离心10~30 min，取上清冷冻干燥，得到枸杞多肽；

枸杞蛋白提取物制备过程中所用有机溶剂为正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或者两种以上；

当采用两种溶剂时，以1:1~1:5的体积比混合；

发酵所用的微生物菌种为嗜热链球菌。

2.一种权利要求1所述方法制备获得的枸杞活性肽。

3.一种抑制剂，其为血管紧张素转化酶（angiotensin-converting enzyme, ACE）抑制剂，其以权利要求2所述的枸杞活性肽为活性成分。

4.按照权利要求3所述抑制剂，其特征在于：

抑制剂中还加入药物学可接受的载体制备成任何剂型形式，所述剂型选自口服剂型：粉剂、片剂、胶囊剂、水性药物制剂、糖浆剂、酊剂、丸剂、散剂或颗粒剂。

5.一种功能食品，权利要求2所述的枸杞活性肽加入到食品中，制备成具有血管紧张素转换酶抑制活性抑制活性的功能食品。

6.一种权利要求2所述枸杞活性肽的应用，其特征在于：

所述枸杞活性肽作为血管紧张素转化酶（angiotensin-converting enzyme, ACE）抑制剂的活性成分，用于制备药品或功能食品。

7.按照权利要求6所述枸杞活性肽的应用，其特征在于：

加入药物学可接受的载体或食品中制备成任何剂型形式，所述剂型选自口服剂型：粉剂、片剂、胶囊剂、软胶囊剂、水性药物、糖浆剂、酊剂、丸剂、散剂、或颗粒剂。