[发明专利]一种应用于细胞体的多色荧光蛋白浓度的检测方法及设备有效
申请号: | 201910808830.X | 申请日: | 2019-08-29 |
公开(公告)号: | CN110455765B | 公开(公告)日: | 2021-11-19 |
发明(设计)人: | 金帆;杨帅;夏爱国 | 申请(专利权)人: | 中国科学院深圳先进技术研究院 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 深圳中一联合知识产权代理有限公司 44414 | 代理人: | 褚淑杰 |
地址: | 518000 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 应用于 细胞体 多色 荧光 蛋白 浓度 检测 方法 设备 | ||
1.一种应用于细胞体的多色荧光蛋白浓度的检测方法,其特征在于,包括:
获取检测所需的启动子的个数,并为每个所述启动子配置关联的荧光蛋白;
将各个所述启动子以及关联的所述荧光蛋白进行组装,生成N色荧光蛋白组件;所述N的值为所述启动子的个数;
将所述N色荧光蛋白组件封装于目标载体,并将所述目标载体导入至待检测对象;
采集所述待检测对象体内关于所述N色荧光蛋白组件的光强参量;
根据各个所述荧光蛋白的光强与浓度之间的斜率参量以及所述光强参量,分别计算各个所述荧光蛋白的浓度值,包括:通过前置实验获取该荧光蛋白在预配置的发光光谱下的发光特性,通过采集不同荧光蛋白浓度下对应的发光光强,构建发光光强与荧光蛋白浓度之间的函数关系,并基于函数关系确定光强与浓度之间的斜率参量;
所述根据各个所述荧光蛋白的光强与浓度之间的斜率参量以及所述光强参量,分别计算各个所述荧光蛋白的浓度值,包括:
从所述光强参量中提取各个所述荧光蛋白对应荧光光谱的荧光光强;所述荧光光强具体为N个所述荧光蛋白在所述荧光光谱下的光强之和;
根据各个所述荧光蛋白在所述荧光光谱对应的所述斜率参量,构建关于各个所述荧光光谱的光强方程;
根据N个所述光强方程,计算出各个所述荧光蛋白的所述浓度值。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述采集所述待检测对象体内关于所述N色荧光蛋白组件的光强参量,包括:
获取用于采集所述N色荧光蛋白组件的荧光光谱的激励光强以及照射时长;
根据所述激励光强以及所述照射时长对所述N色荧光蛋白组件的原始光强进行归一化处理,得到第一中间参量;
获取与采集所述N色荧光蛋白组件的荧光光谱的光路匹配的调整参数以及摄像装置的设备参数,通过所述调整参数与所述设备参数调整所述第一中间参量,得到第二中间参量;
根据所述待检测对象的细胞高度对所述第二中间参量进行调整,得到所述光强参量。
3.根据权利要求1-2任一项所述的检测方法,其特征在于,所述获取检测所需的启动子的个数,并为每个所述启动子配置关联的荧光蛋白,包括:
识别各个所述启动子预配置的第一前缀序列以及第一后缀序列;
从所述荧光蛋白库中选取第二前缀序列与所述第一后缀序列匹配的荧光蛋白作为所述启动子的荧光蛋白。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述将各个所述启动子以及关联的所述荧光蛋白进行组装,生成N色荧光蛋白组件;所述N的值为所述启动子的个数,包括:
将所述启动子与该启动子关联的所述荧光蛋白进行组装,得到单色荧光蛋白组件;所述单色荧光蛋白组件的前缀序列为所述启动子的第一前缀序列,所述单色荧光蛋白组件的后缀序列为关联的所述荧光蛋白第二后缀序列;
若任一其他单色荧光蛋白组件的第二后缀序列与所述单色荧光蛋白组件的第一前缀序列匹配,则识别该其他单色荧光蛋白组件为所述单色荧光蛋白组件的上联蛋白组件;
若任一其他单色荧光蛋白组件的第一前缀序列与所述单色荧光蛋白组件的第二后缀序列匹配,则识别该其他单色荧光蛋白组件为所述单色荧光蛋白组件的下联蛋白组件;
基于所述上联蛋白组件以及所述下联蛋白组件,依次对各个所述单色荧光蛋白组件进行组装,得到所述N色荧光蛋白组件。
5.根据权利要求1-2任一项所述的检测方法,其特征在于,在所述将所述N色荧光蛋白组件封装于目标载体,并将所述目标载体导入至待检测对象之前,还包括:
识别所述待检测对象的对象类型;
获取与所述对象类型匹配的目标载体。
6.根据权利要求1-2任一项所述的检测方法,其特征在于,所述获取检测所需的启动子的个数,并为每个所述启动子配置关联的荧光蛋白,包括:
解析用户发送的测试任务;
基于所述测试任务确定所述启动子的个数。
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