[发明专利]一种测定人体神经丝轻链蛋白含量的磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种测定人体神经丝轻链蛋白含量的磁微粒化学发光检测试剂盒，其特征在于：包括：R1试剂、R2试剂、磁分离试剂、校准品液系列和化学发光底物液；

其中，R1试剂为异硫氰酸荧光素标记的抗神经丝轻链蛋白单克隆抗体稀释液，R2试剂为碱性磷酸酶标记的抗神经丝轻链蛋白抗体稀释液，磁分离试剂为抗异硫氰酸荧光素单克隆抗体包被的磁微粒稀释剂，校准品液系列为含有不同浓度神经丝轻链蛋白的抗原稀释液，化学发光底物液为碱性磷酸酶催化发光的底物液。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述R1试剂是由缓冲液稀释而成的浓度为0.3～0.9μg/mL的异硫氰酸荧光素标记的抗神经丝轻链蛋白单克隆抗体稀释液；

其中，优选的，用于制备R1试剂的缓冲液pH值为7.2～8.0，缓冲液包括浓度为12.0～12.3g/L的Tris、浓度为1.98～1.99g/L的叠氮钠、浓度为5.7～5.9g/L的氯化钠、摩尔浓度为1M的氯化镁溶液0.8～1.2mL/L、摩尔浓度为0.1M的氯化锌溶液0.8～1.2mL/L、浓度为5-20g/L的鱼皮明胶、浓度为2～5g/L的牛血清白蛋白以及浓度为10～50g/L的新生牛血清，其余为去离子水。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述R2试剂是由缓冲液稀释而成的浓度为0.5～2.0μg/mL碱性磷酸酶标记的抗神经丝轻链蛋白抗体稀释液；

其中，优选的，用于制备R2试剂的缓冲液的pH值为7.2～8.0，更优选为商品化的APConjugate Stabilizer。

4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述磁分离试剂是由缓冲液稀释而成的浓度为0.5～2mg/mL的抗异硫氰酸荧光素单克隆抗体包被的磁微粒溶液；

其中，优选的，用于制备磁分离试剂的缓冲液的pH值为7.5～9.0，缓冲液组分为包括浓度为10.5～11.3g/L的Tris、浓度为1.91～1.95g/L的叠氮钠、浓度为5.5～5.7g/L的氯化钠、摩尔浓度为1M的氯化镁溶液0.8～1.2mL/L、摩尔浓度为0.1M的氯化锌溶液0.8～1.2mL/L、浓度为4.7～4.9g/L的牛血清白蛋白以及浓度为4.8～5.0g/L的特级马血清，其余组分为去离子水。

5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述校准品液系列是由缓冲液稀释而成的含有不同浓度神经丝轻链蛋白的抗原稀释液；

其中，优选的，用于制备校准品液系列的缓冲液包括浓度为8.5～10.2g/L的Tris、浓度为11.8～14.5g/L的氯化钠、浓度为0.008～0.028g/L的四环素盐酸盐、浓度为0.008～0.028g/L的硫酸新霉素、浓度为1.5～2.0g/L的叠氮钠、浓度为6.0～10.0g/L的酪蛋白以及浓度为2.6-～3.4g/L的吐温20，其余组分为去离子水。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述校准品液系列的浓度范围为0～500pg/ml，缓冲液pH值为7.0～8.0；

其中，优选的，所述校准品液系列包括分别含有浓度为0pg/ml、10pg/ml、50pg/ml、100pg/ml、250pg/ml、500pg/ml神经丝轻链蛋白的抗原稀释液。

7.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述化学发光底物液是由缓冲液稀释而成的含有0.2～0.4mg/mL碱性磷酸酶催化发光底物的化学发光底物液；

其中，优选的，所述的缓冲液为pH值为8～10的摩尔浓度为0.1-0.3M的Tris-HCl缓冲液，所述的碱性磷酸酶催化发光底物为二氧杂环乙烷化合物(APCL)。

8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：所述化学发光底物液是由pH值为9.3的摩尔浓度为0.2M的Tris-HCl缓冲液稀释而成的含有0.3mg/mL的二氧杂环乙烷化合物(APCL)的化学发光底物液。

9.权利要求1-8任一项所述的试剂盒在制备测定人体样本中神经丝轻链蛋白含量试剂中的用途。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于：所述的样本为人血清、血浆或脑脊液。