[发明专利]一种非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒及其制备方法有效
| 申请号： | 201910816915.2 | 申请日： | 2019-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN112444626B | 公开（公告）日： | 2023-09-12 |
| 发明（设计）人： | 田克恭;昌静峰;王孟月;邓均华 | 申请（专利权）人： | 洛阳普泰生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/535 | 分类号： | G01N33/535;G01N33/533;G01N33/569;G01N21/78 |
| 代理公司： | 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 | 代理人： | 韩登营 |
| 地址： | 471003 河南省洛阳市中国（*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 非洲 猪瘟 病毒 抗体 elisa 检测 试剂盒 及其 制备 方法 | ||
1.一种非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒，其中，所述试剂盒的支持介质上包被有非洲猪瘟病毒抗原，所述非洲猪瘟病毒抗原为非洲猪瘟病毒Δp54蛋白和pK205R蛋白；编码所述Δp54蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码所述pK205R蛋白的核苷酸序列如SEQID NO.2所示；
所述支持介质为96孔酶标板，所述Δp54蛋白包被量为8ng/孔，所述pK205R蛋白包被量为8ng/孔；
所述非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒还包括样品稀释液和封闭液；
所述样品稀释液为含有氯化钠8g、磷酸氢二钠2.9g、磷酸二氢钾0.24g、氯化钾0.2g、纯化水600ml、Proclin3001ml、新生牛血清200ml、PUR染料0.028g混匀，用纯化水定容至1000ml；
所述封闭液为含20％V/V新生牛血清磷酸盐缓冲液。
2.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒，其中，所述非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒还包括洗涤液、羊抗猪酶标二抗、显色液、终止液、抗体阳性猪血清对照以及抗体阴性猪血清对照。
3.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒，其中，所述洗涤液为含有氯化钠8g、磷酸氢二钠2.9g、磷酸二氢钾0.12g、氯化钾0.2g、吐温20 0.5ml、纯化水800ml混匀，补加纯化水定容至1000ml；所述显色液包括显色剂A液和显色剂B液，所述显色剂A液含磷酸氢二钠14.7g、柠檬酸9.3g、过氧化脲0.3g，溶于800ml纯化水混匀，补加纯化水定容至1000ml；所述显色液B含四甲基联苯二胺(TMB)0.2g，无水乙醇10ml，溶于800ml纯化水混匀，补加纯化水定容至1000ml；所述终止液为2M的H2SO4。
4.一种抗非洲猪瘟亚单位疫苗，其中，所述亚单位疫苗包含有免疫量的Δp54蛋白和药学上的载体，编码所述Δp54蛋白的核苷酸如SEQ ID NO.1所示。
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