[发明专利]通用型CAR-T细胞及其制备和应用

说明书

本发明提供了通用型CAR‑T细胞及其制备和应用。更具体地，本发明提供了一种非天然存在的T细胞群，所述的T细胞群中T记忆干细胞的比例C1≥50％，按所述T细胞群中的T细胞总数计。此外，本发明还提供了Tscm富集的靶向肿瘤抗原的通用型CAR‑T细胞。本发明的CAR‑T细胞具有更优异的扩增率、表型、IFN‑γ释放能力及对靶细胞的杀伤能力。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，更具体地涉及通用型CAR-T细胞及其制备和应用

背景技术

免疫疗法，特别是过继性T细胞疗法，在治疗针对血液系统的恶性肿瘤临床试验中显示了强大的疗效和光明前景。T细胞可以被基因修饰来表达嵌合抗原受体(CAR)，它包括抗原识别部分和T细胞激活区。CAR利用单克隆抗体的抗原结合性质能重定向T细胞的特异性和反应性并且以一种非MHC限制的方式靶向靶标。这种非MHC限制抗原识别使表达CAR的T细胞不需要抗原加工就能识别抗原，因此避免了肿瘤逃逸的一种主要机制。除此之外，CAR也不会和内源性TCR的α链，β链产生二聚体。

通用型CAR-T细胞是T细胞免疫疗法中自体T细胞的一种重要替代资源，其中敲除异体T细胞的内源性TRAC和B2M基因以分别防止移植物抗宿主病和宿主免疫排斥。这些来自同种异体供体的基因编辑过的细胞为无法提供足够自体T细胞的患者提供了细胞免疫治疗机会，例如婴儿或接受了多轮化疗的患者。

目前，国内外尚未有获批上市的通用型CAR-T细胞产品，本领域关于通用型CAR-T细胞的研究还有很多的不足，本领域迫切需要开发新的杀伤效果好，安全性高的通用型CAR-T细胞产品。

发明内容

本发明的目的在于提供Tscm富集的通用型CAR-T细胞及其制备和应用。

在本发明的第一方面，提供了一种非天然存在的T细胞群，所述的T细胞群中T记忆干细胞(干细胞样记忆型T细胞，Tscm)的比例C1≥50％，按所述T细胞群中的T细胞总数计。

在另一优选例中，所述的C1≥60％，较佳地C1≥70％，更佳地C1≥75％。

在另一优选例中，所述的C1为50-85％，较佳地60-80％。

在另一优选例中，所述的T细胞包括CAR-T细胞。

在另一优选例中，所述的CAR-T细胞包括自体或异体的CAR-T细胞。

在另一优选例中，所述的CAR-T细胞包括通用型CAR-T细胞。

在另一优选例中，所述的CAR-T细胞中，选自下组的免疫相关基因被敲除或下调：TRAC基因、B2M基因、或其组合。

在另一优选例中，当T记忆干细胞(Tscm)为CAR-T细胞时，所述T记忆干细胞(Tscm)的比例C1≥50％，按所述T细胞群中的CAR-T细胞总数计。

在另一优选例中，所述的C1≥60％，较佳地C1≥70％，更佳地C1≥75％。

在另一优选例中，所述的C1为50-85％，较佳地60-80％。

在另一优选例中，所述的T记忆干细胞具有CCR7⁺表型。

在另一优选例中，在所述T细胞群中，T细胞的含量C3≥30％，较佳地≥50％，更佳地≥70％，更佳地≥80％，≥90％，或≥95％，按所述细胞群中所有细胞的总数计算。

在另一优选例中，C3为30-100％，更佳地70-99.9％，更佳地80-99％。

在另一优选例中，所述的T记忆干细胞包括CCR7⁺CD45RA⁺T细胞。