[发明专利]一种HPLC-DAD测定粗糙凤尾蕨中木犀草苷含量的方法

权利要求书

1.一种HPLC-DAD测定粗糙凤尾蕨中木犀草苷含量的方法，其特征是，具体包括以下步骤：

(1)样品的制备：采集粗糙凤尾蕨药材，进行清洗、干燥、粉碎及筛分；

(2)供试品溶液的制备：称取粗糙凤尾蕨粉末并采用超声辅助提取，得供试品溶液；

(3)对照品储备液的配制：精确称量木犀草苷对照品，并用乙醇配制成一系列不同浓度的对照品溶液；

(4)标准曲线的绘制：取不同浓度的对照品溶液进行HPLC-DAD检测分析，获得不同浓度对照品溶液下的峰面积，将浓度与峰面积进行线性回归分析，得标准曲线回归方程；

(5)供试品溶液中木犀草苷含量测定：取供试品溶液进行HPLC-DAD检测分析，获得供试品溶液中木犀草苷的峰面积，然后根据木犀草苷的标准曲线回归方程的计算木犀草苷的含量。

2.如权利要求1所述的一种HPLC-DAD测定粗糙凤尾蕨中木犀草苷含量的方法，其特征是，所述步骤(1)中采集粗糙凤尾蕨植株的组织样品材料，用去离子水清洗，干燥至恒重后粉碎过100目筛。

3.如权利要求1所述的一种HPLC-DAD测定粗糙凤尾蕨中木犀草苷含量的方法，其特征是，所述步骤(2)中称取步骤(1)所得的样品粉末2.0g，加入100mL的70％乙醇溶液，在60℃下超声：200W，40KHz；提取45min，冷却至室温后，用70％乙醇溶液补充损失的提取溶液，然后过滤，取滤液1mL过0.45μm有机微孔滤膜，即得供试品溶液。

4.如权利要求1所述的一种HPLC-DAD测定粗糙凤尾蕨中木犀草苷含量的方法，其特征是，所述步骤(3)中取木犀草苷对照品14.2mg，置于100mL容量瓶中，加乙醇溶解并定容至刻度，完全溶解摇匀后得到对照品储备液A；然后，分别量取1、2、3、4、5、6mL的对照品储备液A，置于25mL的容量瓶中，加乙醇溶解并定容至刻度，摇匀后得到一系列标准品储备液。

5.如权利要求1所述的一种HPLC-DAD测定粗糙凤尾蕨中木犀草苷含量的方法，其特征是，所述步骤(4)和(5)中采用的色谱条件为色谱柱：YMC-Pack ODS-A(250mm×4.6mm,5μm)；检测器：SPD-20A；流动相：A相为0.5‰(V:V)的三氟乙酸-水溶液，B相为甲醇；梯度洗脱程序：0-30min、30％-60％B，30-35min、60-100％B，35-40min、100％B；进样体积：20μL；柱温：室温；流速：0.5mL/min；检测波长：350nm。