[发明专利]鉴定白菜与埃塞俄比亚芥种间杂种及后代材料A03和C03染色体分离情况的分子标记

权利要求书

1.鉴定白菜和埃塞俄比亚芥种间杂种及追踪其后代材料A03和C03染色体分离情况的SSR分子标记的引物C03A，其特征在于，引物C03A的前向引物序列如SEQ ID No.1所示，引物C03A的后向引物序列如SEQ ID No.2所示。

2.权利要求1所述的引物C03A在鉴定白菜和埃塞俄比亚芥种间杂种及追踪其后代材料A03和C03染色体分离情况上的应用，其特征在于，用引物C03A作为PCR扩增的引物，以待鉴定的植株及白菜与埃塞俄比亚芥亲本DNA为模板进行PCR扩增，检测PCR扩增产物进行条带统计和基因型分析，白菜带型为161bp的扩增片段，埃塞俄比亚芥带型为167bp的扩增片段。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，条带统计和基因型分析的方法为：待鉴定的植株为白菜与埃塞俄比亚芥杂交的F₁植株时，若F₁植株共显白菜带型和埃塞俄比亚芥带型，则该植株为真杂种；若检测的F₁植株只显示白菜带型或只显示埃塞俄比亚芥带型，则该植株为假杂种。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，条带统计和基因型分析的方法为：待鉴定的植株为白菜与埃塞俄比亚芥远缘杂种自交后代植株时，若检测的远缘杂种自交后代植株共显白菜带型和埃塞俄比亚芥带型，则该植株为白菜A03染色体和埃塞俄比亚芥C03染色体整条或部分杂合；若检测的远缘杂种自交后代植株只显白菜带型，则该植株不含埃塞俄比亚芥C03染色体整条或部分；若检测的远缘杂种自交后代植株只显埃塞俄比亚芥带型，则该植株不含白菜A03染色体整条或部分。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，条带统计和基因型分析的方法为：待鉴定的植株为以白菜为回交亲本的回交后代时，若检测的植株共显白菜带型和埃塞俄比亚芥带型，则该植株含有埃塞俄比亚芥C03染色体整条或部分；若只显示白菜带型，则该植株不含埃塞俄比亚芥C03染色体整条或部分。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，条带统计和基因型分析的方法为：待鉴定的植株为以埃塞俄比亚芥为回交亲本的回交后代时，若检测的植株共显白菜带型和埃塞俄比亚芥带型，则该植株含有白菜A03染色体整条或部分；若只显示埃塞俄比亚芥带型，则该植株不含白菜A03染色体整条或部分。

7.根据权利要求2-6任一项所述的应用，其特征在于，PCR扩增的反应体系：10-50μL，其中包括：1×PCR含Mg²⁺Buffer，0.5-100 ng 模板DNA，0.2 mM dNTPs，0.5 μM SEQ IDNo.1primer，0.5 μM SEQ ID No.2 primer，1U Taq酶；PCR扩增的反应程序：94-95℃ 0.5-3min；94-95℃ 30s, 55-60℃ 30S, 72℃ 30S, 35循环； 72 ℃ 5-10 min。