[发明专利]用于检测产毒霍乱弧菌的荧光定量PCR方法及相应的试剂盒在审
| 申请号： | 201910824895.3 | 申请日： | 2019-09-02 |
| 公开（公告）号： | CN111534607A | 公开（公告）日： | 2020-08-14 |
| 发明（设计）人： | 曹亮;喻志红;张新帅;王萌萌;王璋;赵亮;郝祎琪;蒋华;束文圣 | 申请（专利权）人： | 广州微芯生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12R1/63 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510320 广东省广州市广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 霍乱弧菌 荧光 定量 pcr 方法 相应 试剂盒 | ||
1.一种用于检测产毒霍乱弧菌的荧光定量PCR方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、收集样品；
S2、提取基因组DNA；
S3、检测霍乱弧菌属特异性基因rpoB、gene1、gene2和gene3，以及产毒特异性基因gene4；
S4、读取扩增Ct值；当所述霍乱弧菌属特异性基因中至少1个基因和所述产毒特异性基因的Ct值均小于35时，产毒霍乱弧菌的检测结果为阳性；当所述霍乱弧菌属特异性基因rpoB、gene1、gene2、gene3的Ct值大于35和/或所述产毒特异性基因gene4的Ct值大于35时，产毒霍乱弧菌的检测结果为阴性。
2.根据权利要求1所述的用于检测产毒霍乱弧菌的荧光定量PCR方法，其特征在于，所述霍乱弧菌属特异性基因rpoB的检测引物如SEQ ID NO:1～2所示。
3.根据权利要求1所述的用于检测产毒霍乱弧菌的荧光定量PCR方法，其特征在于，所述霍乱弧菌属特异性基因gene1的检测引物如SEQ ID NO:3～4所示。
4.根据权利要求1所述的用于检测产毒霍乱弧菌的荧光定量PCR方法，其特征在于，所述霍乱弧菌属特异性基因gene2的检测引物如SEQ ID NO:5～6所示。
5.根据权利要求1所述的用于检测产毒霍乱弧菌的荧光定量PCR方法，其特征在于，所述霍乱弧菌属特异性基因gene3的检测引物如SEQ ID NO:7～8所示。
6.根据权利要求1所述的用于检测产毒霍乱弧菌的荧光定量PCR方法，其特征在于，所述产毒特异性基因gene4的检测引物如SEQ ID NO:9～10所示。
7.一种用于检测产毒霍乱弧菌的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，包含权利要求2～6所述的霍乱弧菌属特异性基因rpoB、gene1、gene2、gene3的检测引物和产毒特异性基因gene4的检测引物。
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