[发明专利]念珠菌检测设备及检测方法

说明书

本发明公开了一种念珠菌检测装置及检测方法，包括离心机、聚合酶链式反应仪、磁共振检测系统、念珠菌磁性纳米探针、探针盛放装置和传送装置，全血试样由所述传送装置送至离心机旋转离心处理，再由传送装置送至聚合酶链式反应仪进行聚合酶链式反应，全血试样经过旋转离心处理和聚合酶链式反应后与所述念珠菌磁性纳米探针混合，之后由传送装置将混合液体送至磁共振检测系统进行T2弛豫时间测量，根据所述T2弛豫时间检测念珠菌是否存在，并确定念珠菌的种类。本发明可以实现灵敏、快速的念珠菌检测。

技术领域

本发明涉及医疗设备领域，具体地说是一种念珠菌检测设备及检测方法。

背景技术

近年来由于广谱抗菌药物、糖皮质激素、免疫抑制剂的广泛应用，导管、插管、化疗及介入治疗、器官移植等新诊疗技术的广泛开展，加上肿瘤、移植、糖尿病、艾滋病等高危人群的逐年增多，念珠菌病的发病率呈明显上升趋势，已成为目前最常见的深部真菌病，其中念珠菌血症是最常见的血流感染之一，病死率可达40％，显著高于细菌引起的血流感染，且治疗疗程长，医疗费用巨大。

念珠菌血症早期诊断、早期治疗预后较好，但临床初期症状不明显，早期诊断困难，延误诊断或播散性感染预后不良。研究表明，在12小时内开始针对性的抗真菌治疗可以将病死率从40％降低至11％，念珠菌血症发展成败血症后，每延迟一个小时治疗，病死率将提高7.6％。在缺乏依据的情况下，加用抗真菌药物会增加治疗成本和不良反应的风险，因而念珠菌的早期快速分型具有重要的临床意义，早期将念珠菌鉴定到种的水平对指导用药有很大的帮助。

念珠菌检测主要包括形态学方法、免疫学检测、血液培养和分子生物学检查等。其中血液培养是判断念珠菌血症的金标准，需要从两侧上肢静脉采血，“双瓶双侧”采血培养。传统手工血培养方法一般孵育7天，自动化血培养系统的标准血培养周期为5天。血培养是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法，血培养结果对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义，但是血培养法仅有50％左右的阳性率，检测灵敏度低，且检测周期也长，不能满足临床的快速、准确检测之需求。

发明内容

有鉴于此，本发明针对上述现有技术存在的灵敏度低、检测时间长等问题，提供一种灵敏、快速的念珠菌检测设备及检测方法。

本发明的技术解决方案是，提供一种念珠菌检测设备，包括离心机、聚合酶链式反应仪、磁共振检测系统、念珠菌磁性纳米探针、探针盛放装置和传送装置，全血试样由所述传送装置送至离心机旋转离心处理，再由传送装置送至聚合酶链式反应仪进行聚合酶链式反应，全血试样经过旋转离心处理和聚合酶链式反应后与所述念珠菌磁性纳米探针混合，之后由传送装置将混合液体送至磁共振检测系统进行T2弛豫时间测量，根据所述T2弛豫时间检测念珠菌是否存在，并确定念珠菌的种类。

所述念珠菌磁性纳米探针包含具有缀合到磁性粒子表面的第一探针和第二探针，第一探针的作用是结合到靶核酸的第一区段，第二探针的作用是结合到靶核酸的第二区段，磁性粒子在靶核酸存在下形成聚集体，显著增大分析物的T2弛豫时间；所述磁共振检测系统使用在念珠菌与念珠菌磁性纳米探针结合之前的纳米粒子溶液来测量T2弛豫时间的基线值，然后对所述混合液体测量T2弛豫时间，以判断T2弛豫时间是否发生变化。

可选的，在聚合酶链式反应正向引物和反向引物存在下对待检测的核酸进行扩增，寡核苷酸探针分别与聚合酶链式反应产物的5’和3’端的嵌套序列互补，杂交到扩增子的5’端的捕获探针被3’胺化，杂交到扩增子的3’端的捕获探针被5’胺化，所述正向引物包含寡核苷酸序列5’—GGC ATG CCT GTT TGA GCG TC—3’，所述反向引物包含寡核苷酸序列5’—GCT TAT TGA TAT GCT TAA CAG CGG GT—3’。