[发明专利]抗VEGF单域抗体及其应用有效
| 申请号： | 201910829413.3 | 申请日： | 2019-09-03 |
| 公开（公告）号： | CN110452297B | 公开（公告）日： | 2020-04-14 |
| 发明（设计）人： | 万亚坤;朱敏;盖军伟;沈晓宁 | 申请（专利权）人： | 上海洛启生物医药技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/22 | 分类号： | C07K16/22;C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00;A61P9/00;A61P27/02;A61P27/06;G01N33/68;G01N33/574 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 胡丹;徐迅 |
| 地址： | 201321 上海市浦东*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | vegf 抗体 及其 应用 | ||
1.一种抗VEGF单域抗体，其特征在于，所述抗VEGF单域抗体的VHH链的互补决定区CDR包括SEQ ID NO:1所示的CDR1、SEQ ID NO:2所示的CDR2、和SEQ ID NO:3所示的CDR3。
2.一种抗VEGF单域抗体，其特征在于，所述抗VEGF单域抗体的VHH链包括框架区FR和权利要求1所述的抗VEGF单域抗体的VHH链的互补决定区CDR，所述的框架区FR包括：
(a)SEQ ID NO:4所示的FR1、SEQ ID NO:5所示的FR2、SEQ ID NO:6所示的FR3、和SEQID NO:7所示的FR4；或
(b)SEQ ID NO:10所示的FR1、SEQ ID NO:11所示的FR2、SEQ ID NO:12所示的FR3、和SEQ ID NO:13所示的FR4。
3.如权利要求2所述的抗VEGF单域抗体，其特征在于，所述的抗VEGF单域抗体的VHH链如SEQ ID NO:14所示。
4.一种抗体，其特征在于，所述抗体包括一条或多条如权利要求2所述的抗VEGF单域抗体的VHH链。
5.如权利要求4所述的抗体，其特征在于，所述抗体包括单体、二价抗体、和/或多价抗体。
6.如权利要求4所述的抗体，其特征在于，所述抗体包含一条或多条氨基酸序列如SEQID NO:14所示的VHH链。
7.如权利要求4所述的抗体，其特征在于，所述抗体包括两条氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示的VHH链。
8.如权利要求4所述的抗体，其特征在于，所述抗体的VHH链的氨基酸序列如SEQ IDNO:14所示。
9.如权利要求7所述的抗体，其特征在于，所述两条氨基酸序列如SEQ ID NO:14中所示的VHH链之间通过连接子进行连接。
10.如权利要求9所述的抗体，其特征在于，所述连接子选自下组：GGGGSGGGS(SEQ IDNO:18)、GS(SEQ ID NO:19)、GGGGS(SEQ ID NO:20)。
11.如权利要求4所述的抗体，其特征在于，所述抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示。
12.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码选自下组的蛋白质：权利要求1或2所述的抗VEGF单域抗体，或权利要求4所述的抗体。
13.如权利要求12所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸的核苷酸序列如SEQ IDNO:9或15所示。
14.如权利要求12所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸的核苷酸序列如SEQ IDNO:17所示。
15.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求12所述的多核苷酸。
16.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求15所述的表达载体，或其基因组中整合有权利要求12所述的多核苷酸。
17.一种产生抗VEGF单域抗体的方法，其特征在于，包括步骤：
(a)在适合产生单域抗体的条件下，培养权利要求16所述的宿主细胞，从而获得含所述抗VEGF单域抗体的培养物；以及
(b)从所述培养物中分离或回收所述的抗VEGF单域抗体；以及
(c)任选地，纯化和/或修饰步骤(b)中获得的抗VEGF单域抗体。
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