[发明专利]酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物、其制备方法及应用

权利要求书

1.一种酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物的制备方法，其特征在于包括：

采用胰蛋白酶对酪蛋白进行水解处理形成酪蛋白水解物，其中胰蛋白酶的添加量为20~60U/g酪蛋白，水解处理时间为10~15 min，酪蛋白水解物的水解度为2%~8%；

将酪蛋白水解物、果胶分散于水中形成混合液，并使所述混合液中酪蛋白水解物与果胶的浓度为1~2 w/v %，酪蛋白水解物与果胶的质量比为1：1~1：4，所述果胶为酯化度为8~20%的低甲氧基果胶，之后向所述混合液中加入漆酶混合均匀形成混合体系，其中漆酶的添加量为200~400U/g酪蛋白水解物，在温度为40~50℃下，使酪蛋白水解物中的酪氨酸与果胶中的阿魏酸通过漆酶诱导进行共价接枝反应18~24h，形成水解酪蛋白-果胶接枝物，并且在所述共价接枝反应完成后，将所述反应体系于90~100℃加热5~10min，之后冷冻干燥；

采用原儿茶酸对所述水解酪蛋白-果胶接枝物进行改性处理，所述改性处理包括：

将水解酪蛋白-果胶接枝物与水混合，形成水解酪蛋白-果胶接枝物溶液，并调节pH值为8.5~9.5；

将原儿茶酸与乙醇混合，形成原儿茶酸溶液；

使所述水解酪蛋白-果胶接枝物溶液、原儿茶酸溶液混合并于20~25℃进行改性处理20~24h，获得酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述原儿茶酸溶液中原儿茶酸的浓度为0.01~0.04g/mL。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于还包括：在所述改性处理完成后，将反应体系透析20~24h，之后冷冻干燥。

4.由权利要求1-3中任一项所述的制备方法制备的酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物。

5.一种酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物纳米乳液的制备方法，其特征在于包括：

按照权利要求1-3中任一项所述方法制备酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物；

使疏水性生物活性物质溶于油相溶剂中，并于50~60℃避光搅拌10~20min，之后于室温下搅拌1~2h，制得油相组分；

将所述酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物溶于磷酸盐缓冲液中，并搅拌2~4h，使蛋白充分溶胀，形成酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物的水相溶液，其中酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物的含量为1~2wt%；

采用高压均质和微射流技术，使所述酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物的水相溶液与油相组分均匀混合，其中油相组分与水相溶液的质量比为1：9~2：8，获得水包油型的酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物纳米乳液。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于包括：采用高压均质技术，对所述油相组分和水相溶液的混合液于15℃以下进行剪切2~5min，形成粗乳液，之后采用高压微射流技术，在60~100MPa下将所述粗乳液进一步进行均化处理，获得酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物纳米乳液，之后于2~6℃下储存。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述剪切采用的转速为10000~20000rpm。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述油相溶剂包括玉米油。

9.由权利要求5-8中任一项所述的制备方法制备的酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物纳米乳液。

10.根据权利要求9所述的酪蛋白-果胶-原儿茶酸三元复合物纳米乳液，其特征在于：所述纳米乳液的颗粒形态结构为球形，乳液中液滴粒径分布为77.39~213.32nm。