[发明专利]一种以廉价底物生产亚精胺的方法及工程菌有效
| 申请号： | 201910833797.6 | 申请日： | 2019-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN112442518B | 公开（公告）日： | 2022-10-11 |
| 发明（设计）人： | 蔡宇杰;梁鑫鑫;胡小祥;丁彦蕊;白亚军;郑晓晖 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P13/00 | 分类号： | C12P13/00;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 廉价 生产 精胺 方法 工程 | ||
1.一种以氨基酸为底物合成亚精胺的方法，其特征在于，是以L-谷氨酸与1,3-丙二胺为底物合成亚精胺，L-谷氨酸被γ-谷氨酸激酶以ATP为辅酶催化生成谷氨酰-β-磷酸和ADP，L-谷氨酰-β-磷酸被谷氨酸-5-半醛脱氢酶以NADPH或NADH为辅酶催化生成L-谷氨酸半醛和NAD或NADP；羧基亚精胺脱氢酶以NADPH或NADH为辅酶将L-谷氨酸半醛和1,3-丙二胺合成为异羧基亚精胺，辅酶再生为NAD或NADP，最后羧基亚精胺脱羧酶将异羧基亚精胺脱羧生成亚精胺；在以上过程中由葡萄糖脱氢酶实现NADH或NADPH的再生、由多聚磷酸盐激酶2-I实现ATP的再生；
γ-谷氨酸激酶的氨基酸序列在NCBI上是ACT42138.1，
谷氨酸-5-半醛脱氢酶的氨基酸序列在NCBI上是ACT45636.1，
编码羧基亚精胺脱氢酶的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2，
编码羧基亚精胺脱羧酶的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4，
葡萄糖脱氢酶的氨基酸序列在NCBI上是WP_013351020.1，
多聚磷酸盐激酶2-I的氨基酸序列在NCBI上是NP_384613.1。
2.根据权利要求1所述的一种以氨基酸为底物合成亚精胺的方法，其特征在于，所述1,3-丙二胺经由以下途径得到：L-天冬氨酸被天冬氨酸激酶以ATP为辅酶催化生成天冬氨酰-β-磷酸和ADP，天冬氨酰-β-磷酸被天冬氨酸-β-半醛脱氢酶以NADPH或NADH为辅酶催化生成L-天冬氨酸半醛和NAD或NADP，L-天冬氨酸半醛被胺脱氢酶合成L-2,4-双胺丁酸，然后被L-2,4双胺丁酸脱羧酶脱羧生成1,3-丙二胺；在以上过程中由葡萄糖脱氢酶实现NADH或NADPH的再生、由多聚磷酸盐激酶2-I实现ATP的再生，
天冬氨酸激酶的氨基酸序列在NCBI上accession NO为ERI80757.1，
天冬氨酸-β-半醛脱氢酶的氨基酸序列在NCBI上accession NO为：EIM32299.1，
胺脱氢酶的氨基酸序列在NCBI上是ORV29844.1，
L-2,4双胺丁酸脱羧酶的氨基酸序列在NCBI上是GG704575.1。
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