[发明专利]同时定量检测食用油中黄曲霉毒素总量、玉米赤霉烯酮的嵌合ELISA试剂盒

说明书

本发明实施例公开了一种同时定量检测食用油中黄曲霉毒素总量、玉米赤霉烯酮的嵌合ELISA试剂盒，所述嵌合ELISA试剂盒包括偶联黄曲霉毒素总量全抗原和偶联玉米赤霉烯酮全抗原、黄曲霉毒素总量单克隆抗体、玉米赤霉烯酮单克隆抗体、基准液、同时包被所述黄曲霉毒素总量全抗原和玉米赤霉烯酮全抗原的酶标板以及用于ELISA实验的显色液、终止液和稀释液；所述基准液用于作为空白对照组的溶液；测定待测样品时，同时检测加入基准液的空白对照组和加入待测样品组的OD值，通过所述OD值计算得到所述待测样品的浓度。本发明实施例提供一种同时定量检测食用油中黄曲霉毒素总量、玉米赤霉烯酮残留检测试剂盒，其操作简便、检测快速、准确、成本低、稳定性好。

技术领域

本发明实施例涉及生物检测技术领域，具体涉及一种同时定量检测食用油中黄曲霉毒素总量、玉米赤霉烯酮的嵌合ELISA试剂盒。

背景技术

黄曲霉素(Aflatoxin,AFT)，是一类真菌毒素，主要是由黄曲霉 (Aspergillusflaw)、寄生曲霉(Aspergillus parasitwus)和集峰曲霉(Aspergillusnomius)产生的次生代谢产物。目前已分离鉴定出18种属于该类的毒素，黄曲霉毒素B1最常见，以下简称AFB1，它具有极强的致癌性，广泛存在于食品中，对其进行及时、快速、高效地检测和有效的分离，控制含量在允许的范围内至关重要。黄曲霉素是目前发现的化学致癌物中公认致癌性最强的物质之一，能使灵长类、禽类、鱼类及猴等实验动物诱发实验性肝癌，主要病变表现为肝出血、坏死、胆管增生和肝硬化等。

玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是广泛存在于饲料和谷物中的一种毒素，它是由真菌产生的次级代谢产物，对玉米、小麦、大麦、燕麦、稻谷等具有很强的污染性，它具有类雌激素作用，会对人和动物产生很大的危害。最近研究表明，ZEN除了对繁殖机能造成影响外，还具有免疫毒性、肝毒性和细胞毒性，且对肿瘤的发生也有一定影响。

目前，检测黄曲霉素和玉米赤霉烯酮的都是单独分开检测，需要测定的样本量多，检测过程麻烦，对操作的要求高，检测结果不准确，亟待进一步改进。

发明内容

为此，本发明实施例提供一种同时定量检测食用油中黄曲霉毒素总量、玉米赤霉烯酮的嵌合ELISA试剂盒及其制备方法，以解决现有技术中检测试剂盒检测过程复杂，检测结果不准确的问题。

为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：

一种同时定量检测食用油中黄曲霉毒素总量、玉米赤霉烯酮的嵌合ELISA 试剂盒，所述嵌合ELISA试剂盒包括偶联黄曲霉毒素总量全抗原和偶联玉米赤霉烯酮全抗原、黄曲霉毒素总量单克隆抗体、玉米赤霉烯酮单克隆抗体、基准液、同时包被所述黄曲霉毒素总量全抗原和玉米赤霉烯酮全抗原的酶标板以及用于ELISA实验的显色液、终止液和稀释液；所述基准液用于作为空白对照组的溶液；

测定待测样品时，同时检测加入基准液的空白对照组和加入待测样品组的 OD值，通过所述OD值计算得到所述待测样品的浓度。

优选的，所述基准液为硼酸、氢氧化钠、色氨酸和乙二胺四乙酸的水溶液。

优选的，所述黄曲霉毒素总量单克隆抗体是通过黄曲霉毒素总量AFT细胞株4E9株制备得到的，所述黄曲霉毒素总量AFT细胞株4E9株已于2019 年4月28日保藏于位于中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C201991；

所述玉米赤霉烯酮单克隆抗体是通过ZEN 6G1细胞株制备得到的，所述 ZEN 6G1细胞株已于2019年7月4日保藏于位于中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2019153。

优选的，储存有预先建立的用于计算待测样本中黄曲霉毒素总量和玉米赤霉烯酮含量的标准曲线的数据处理装置。