[发明专利]一种用于DNA大量提取的水稻叶片的制备方法在审
申请号: | 201910836618.4 | 申请日: | 2019-09-05 |
公开(公告)号: | CN110484533A | 公开(公告)日: | 2019-11-22 |
发明(设计)人: | 田孟祥;宫彦龙;张时龙;雷月;吴美玲;李佳丽;田晋文;张大双;闫志强;何友勋;余本勋;叶永印;王昭礼;吴瑞;陈春艳 | 申请(专利权)人: | 毕节市农业科学研究所;贵州省水稻研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 50230 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 陈炳萍<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 551714 *** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水稻叶片 离心管 液氮法 干燥箱 烘干 液氮 叶片 制备方法流程 长时间作业 操作程序 工作效率 使用费用 研磨 研磨棒 研磨粉 浸出 易被 冻伤 制备 装入 取出 塑料 保存 环节 | ||
1.一种用于DNA大量提取的水稻叶片的制备方法,其特征在于,具体制备方法流程如下:
S1、水稻叶片装入2mL离心管;
S2、装有叶片的2mL离心管置于干燥箱中烘干;
S3、从干燥箱中取出离心管,用塑料研磨棒进行研磨。
2.根据权利要求1所述的一种用于DNA大量提取的水稻叶片的制备方法,其特征在于,在步骤S1中的水稻叶片为新鲜叶片,用量为0.3-0.4g。
3.根据权利要求1所述的一种用于DNA大量提取的水稻叶片的制备方法,其特征在于,在步骤S2中设置5个烘干温度,分别是50℃、60℃、70℃、80℃和90℃。
4.根据权利要求1所述的一种用于DNA大量提取的水稻叶片的制备方法,其特征在于,在步骤S2中的烘干时间为24h。
5.根据权利要求1所述的一种用于DNA大量提取的水稻叶片的制备方法,其特征在于,在步骤S2中每个温度设置三次重复。
6.根据权利要求1所述的一种用于DNA大量提取的水稻叶片的制备方法,其特征在于,从干燥箱中取出离心管,放在离心管架上,达到固定离心管的目的,用塑料研磨棒伸入离心管内,上下来回敲击叶片,搅碎叶片成粉状。
7.根据权利要求1-6所述的一种用于DNA大量提取的水稻叶片的制备方法,其特征在于,以水稻新鲜叶片直接液氮冷冻研磨为对照。
8.根据权利要求1-7所述的一种用于DNA大量提取的水稻叶片的制备方法,其特征在于,叶片制备好后,加入DNA提取液对水稻DNA进行提取,然后将提取到的DNA进行PCR扩增,对DNA提取质量进行分析。
9.根据权利要求1-8所述的一种用于DNA大量提取的水稻叶片的制备方法,其特征在于,以烘干法对叶片进行制备,其DNA提取质量最佳的烘干温度为50℃。
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