[发明专利]一种连续流固定化甲酰甘氨酸生成酶反应器及其使用方法与应用在审
| 申请号： | 201910838792.2 | 申请日： | 2019-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN110616146A | 公开（公告）日： | 2019-12-27 |
| 发明（设计）人： | 贾凌云;彭强;任军;臧柏林 | 申请（专利权）人： | 大连理工大学 |
| 主分类号： | C12M1/40 | 分类号： | C12M1/40;C07K1/107 |
| 代理公司： | 21212 大连东方专利代理有限责任公司 | 代理人： | 周媛媛;李馨 |
| 地址： | 116024 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甘氨酸 甲酰 固定化 固定化酶 固定化酶技术 连续流反应器 琼脂糖凝胶 醛基化修饰 产物分离 催化效率 连续催化 酶反应器 应用成本 铜离子 固载 可控 重构 应用 蛋白 放大 自动化 | ||
1.一种连续流固定化甲酰甘氨酸生成酶反应器，其特征在于：包括泵和反应腔体，所述反应腔体中填装有固定化甲酰甘氨酸生成酶，所述固定化甲酰甘氨酸生成酶是将甲酰甘氨酸生成酶固定到载体基质上，在连续流反应时，反应溶液中还加入了还原剂。
2.根据权利要求1所述的连续流固定化甲酰甘氨酸生成酶反应器，其特征在于：所述泵包括微量蠕动泵、高效液相泵、注射泵。
3.根据权利要求1所述的连续流固定化甲酰甘氨酸生成酶反应器，其特征在于：所述甲酰甘氨酸生成酶包括来源于结核分枝杆菌的甲酰甘氨酸生成酶、来源于天蓝色链霉菌的甲酰甘氨酸生成酶、来源于弯曲高温单胞菌的甲酰甘氨酸生成酶。
4.根据权利要求1所述的连续流固定化甲酰甘氨酸生成酶反应器，其特征在于：所述载体基质包括环氧活化的琼脂糖微球、四氧化三铁磁性微球、二氧化硅微球。
5.根据权利要求1所述的连续流固定化甲酰甘氨酸生成酶反应器，其特征在于：所述反应溶液中加入的还原剂包括二硫苏糖醇、巯基乙醇、三(2-羧乙基)膦、巯基乙胺。
6.根据权利要求1所述的连续流固定化甲酰甘氨酸生成酶反应器的使用方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)启动泵，使用反应缓冲液冲洗反应腔体；
(2)将带有醛基标签的样品溶于反应缓冲液中并加入还原剂，然后泵入连续流固定化甲酰甘氨酸生成酶反应器反应腔体，使样品流经反应器，收集反应器流出的液体，即得到醛基化修饰后的样品。
7.根据权利要求6所述的使用方法，其特征在于：所述步骤(1)中反应缓冲液为50mM三乙醇胺，pH 9.0，50mM氯化钠。
8.根据权利要求6所述的使用方法，其特征在于：所述步骤(2)中样品流经反应器的保留时间大于4分钟。
9.根据权利要求1-5中任一项所述的连续流固定化甲酰甘氨酸生成酶反应器在纳米抗体的定点醛基化修饰中的应用。
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