[发明专利]一种紫草液相分离时色谱峰的质量的定量分析方法

权利要求书

1.一种紫草液相分离时色谱峰的质量的定量分析方法，其特征在于：

1)以已知化合物溶液为定量参比，所述已知化合物溶液为β,β-二甲基丙烯酰紫草素的甲醇溶液；

以一系列2个以上(优选5个以上)不同浓度的β,β-二甲基丙烯酰紫草素的甲醇溶液为参比，采用电喷雾检测器(CAD)的反相高效液相色谱法进行检测；分别以log(质量)与其log(CAD峰面积)为横纵坐标，建立参比化合物log(质量)与其log(CAD峰面积)的关系图，采用加权1/X²最小二乘法进行回归计算，求得它们的线性回归方程与相关系数；其中，X为参比log样品质量；

2)再对待测紫草样品溶液采用电喷雾检测器(CAD)的反相高效液相色谱法进行检测，并根据检测的CAD色谱峰面积结果代入上述方程中计算待测紫草样本液相分离时各个色谱峰的质量。

2.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于：以紫草的乙醇提取物的石油醚萃取样品为待分析样品。

3.根据权利要求2所述的定量分析方法，其特征在于：

待分析样品的制备过程为：取紫草药材粉碎后过2号筛(24目)，取通过筛子的粉体经体积分数70％-95％乙醇常温下冷浸萃取、过滤，滤渣再次冷浸萃取、过滤，共冷浸萃取、过滤3次以上，每次60-72小时，冷浸温度10-30℃；收集并合并滤液在50-55℃下减压旋蒸干燥，干燥后再用石油醚萃取；

收集石油醚层液体，30-40℃下减压旋蒸干后，复溶于甲醇中得到待分析样品。

4.根据权利要求1、2或3所述的定量分析方法，所述紫草为新疆紫草药材，至少包括新疆紫草全草、根、茎、叶中的一种或二种以上。

5.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于：

所述的高效液相色谱条件为：

色谱柱为C18色谱柱；

流动相A为乙腈，流动相B为水，流速为0.7-1mL/min，柱温为25-35℃，进样量为10-100μL；

采用等度洗脱程序，0-50min内，流动相A和流动相B的体积比为70％:30％。

6.根据权利要求5所述的定量分析方法，其特征在于：

色谱柱为华谱C18色谱柱，内径为4.6mm，柱长为250mm，填料粒径为5μm；流动相A为乙腈，流动相B为水，流速为1mL/min，柱温为30℃。

7.根据权利要求1、5或6所述的定量分析方法，其特征在于：所述的电喷雾检测器的条件为，雾化温度为30-80℃。

8.根据权利要求7所述的定量分析方法，其特征在于，所述的电喷雾检测器的条件为，雾化温度为35℃。

9.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述β,β-二甲基丙烯酰紫草素的甲醇溶液的浓度范围为0.002-6mg/mL。

10.根据权利要求1、2或3所述的定量分析方法，其特征在于，所述待分析样品的浓度范围为0.01-30mg/mL。