[发明专利]用于乳腺癌的早期筛查、诊断、疗效监测和/或预后评价的检测引物组合及试剂盒在审
| 申请号： | 201910845893.2 | 申请日： | 2019-09-09 |
| 公开（公告）号： | CN110607367A | 公开（公告）日： | 2019-12-24 |
| 发明（设计）人： | 李萍;许涛;谢小兵;张贞;易帆;曾召琼;邓长娟 | 申请（专利权）人： | 湖南中医药大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司： | 43244 长沙智路知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 陈建国 |
| 地址： | 410208 湖南省长*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 逆转录引物 疗效监测 预后评价 早期筛查 乳腺癌 诊断 检测结果 检测试剂 检测引物 碱基序列 序列延长 逆转录 | ||
1.一种用于乳腺癌的早期筛查、诊断、疗效监测和/或预后评价的RNA hsa-miR-141-3p检测引物组合，其特征在于，包括逆转录引物和PCR引物，所述逆转录引物的碱基序列如SEQID No.2所示。
2.根据权利要求1所述的引物组合，其特征在于，所述PCR引物包括PCR上游引物，
所述上游引物的碱基序列如SEQ ID No.3所示。
3.根据权利要求2所述的引物组合，其特征在于，所述PCR引物还包括PCR下游引物，
所述下游引物的碱基序列如SEQ ID No.4所示。
4.一种试剂盒，其特征在于，其包含权利要求1至3任一项所述的引物组合。
5.如权利要求1至3任一项所述的引物组合或权利要求4所述的试剂盒在乳腺癌的早期筛查、诊断、疗效监测和/或预后评价中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述应用的方法包括以下步骤：
S1、提取待测样品的总DNA；
S2、采用权利要求1至3任一项所述的引物组合对所述总DNA进行PCR扩增；
S3、对步骤S2获得的扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述PCR的扩增体系包括：25mM的MgCl2溶液4μL，缓冲液5μL，Taq DNA聚合酶2μL，2mM的dNTP 5μL，10μM的上游引物1μL，10μM的下游引物1μL，ddH2O 30μL，逆转后cDNA模板2uL。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述PCR的扩增过程包括变性过程、退火过程和延伸过程，所述变性过程的条件为94℃变性15秒，所述退火过程的条件为60℃退火30秒，所述延伸过程的条件为70℃延伸30秒。
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